Магниттик универсалдуу вирустук ДНК/РНК комплекти HYD521
Магниттик универсалдуу вирустук ДНК/РНК комплекти кандын же клеткасыз дене суюктуктарынан (сыворотка, плазма, мээ-жүлүн суюктугу, мурун/кекиртек тампондору, альвеолярдык жуу суюктугу ж.б.) вирустук нуклеин кислотасын бөлүп алууга ылайыктуу. Бул ыкма магниттик мончокторду тазалоо технологиясын колдонот жана бөлүп алуу процессинде уулуу фенол хлороформду бөлүп алуу талап кылынбайт. Ал коопсуз, уулуу эмес жана тез. Алынган продукт түздөн-түз ПТРде, qPCRде, экинчи муундагы секвенирлөөдө жана башка эксперименттерде колдонулушу мүмкүн. Магниттик мончокторду автоматташтырылган бөлүп алуу шаймандары менен колдонулганда, нуклеин кислоталарын жогорку өндүрүмдүүлүктө бөлүп алууга жетишүүгө болот.
Продукция жөнүндө маалымат
| Компоненттер | 48T |
| Лизис жана байланыштыруучу эритме | 33 мл |
| Магниттик мончок асма | 1,1 мл |
| Кир жуугуч буфер A | 40 мл |
| Кир жуугуч буфер B | 80 мл |
| Элюциялык эритме | 10 мл |
| Протеиназа К | 1,1 мл |
Сактоо шарттары
Протеиназа К 2~8°C температурада, ал эми калган ингредиенттер бөлмө температурасында сакталышы керек. Сактоо мөөнөтү 18 ай.
Үлгү сүрөттөмөсү
1. Колдонулуучу үлгүлөрдүн түрлөрү: бүтүн кан, сыворотка, плазма, жүлүн суюктугу, мурун/кекиртектен алынган мазоктор, альвеолярдык жуу суюктугу жана башка үлгүлөр.
2. Үлгүлөрдү сактоо жана ташуу: Үлгүлөрдү дароо сыноо үчүн колдонсо болот же сыноо үчүн -70℃ же андан төмөн температурада сактаса болот. Сактоо мөөнөтү 6 ай. Кайталап тоңдуруудан жана эритүүдөн алыс болуу керек. Үлгүлөр муздак чынжыр аркылуу ташылат.
3. Тоңдуруу-эритүү талаптары: Тез тоңдуруу жана эритүү, кайталап тоңдуруудан жана эритүүдөн алыс болуңуз.
Операция
Эксперимент жүргүзүүдөн мурун, эритмеде чөкмө бар же жок экенин жана магниттик мончокторду кайра илип коюуга болорун текшериңиз.
1. 200~300 мкл үлгүнү 1,5 мл центрифуга түтүгүнө которуп, 600 мкл Лизис жана Байланыштыруучу Эритмени, 20 мкл Протеиназа К жана 20 мкл магниттик Шуру Суспензиясын удаалаш кошуп, жогорку ылдамдыкта 30 секунд куюңуз. 50°C температурада 5~7 мүнөт инкубациялаңыз. Эгерде термостаттын термелүү функциясы жок болсо, инкубация мезгилинде 3 жолу, ар бир жолу 15 секунддан куюңуз.
2. Эритме тунук жана тунук болгонго чейин магниттик бөлүү үчүн 1,5 мл магниттик стендге салып, эритмени төгүп салыңыз.
3. 700 мкл жуугуч буфер А кошуп, магниттик мончокторду майдалоо үчүн 10 секунд аралаштырыңыз, андан кийин эритме тунук болгонго чейин магниттик бөлүү үчүн магниттик стендге салып, эритмени төгүп салыңыз.
4. 700 мкл жуугуч буфер B кошуп, магниттик мончокторду майдалоо үчүн 10 секунд вортекстеп, эритме тунук болгонго чейин магниттик бөлүү үчүн магниттик стендге которуп, эритмени төгүп салыңыз.
5. 700 мкл жуугуч буферди B кайрадан кошуп, магниттик мончокторду майдалоо үчүн 10 секунд вортекстеп, эритме тунук болгонго чейин магниттик бөлүү үчүн магниттик стендге которуп, эритмени төгүп салыңыз.
6. Түтүктүн дубалындагы тамчыларды чогултуу үчүн кыска убакытка центрифугалаңыз, тунуктоо үчүн магниттик стендге которуңуз жана калган суюктукту сиңириңиз. 3-5 мүнөт абада кургатыңыз.
Эскертүү: Этанолдун калдыгы кийинки ферменттик реакцияларды басаңдатат, андыктан кургатканда этанол толугу менен бууланып кетишин текшериңиз. Кийинки элюция эффектине таасир этпөө үчүн өтө көпкө кургатпаңыз.
7. 40~100 мкл Элюция эритмесин кошуп, магниттик мончокторду майдалоо үчүн жогорку ылдамдыкта 2~3 мүнөт аралаштырыңыз. 60℃ температурада 5 мүнөт инкубациялаңыз, андан кийин жогорку ылдамдыкта 60 секунд аралаштырыңыз.
8. Түтүктүн капкагынан суюктукту чогултуу жана магниттик мончоктор толугу менен адсорбцияланганга чейин аны магниттик текчеге которуу үчүн заматта центрифуга жасаңыз. Андан кийин нуклеин кислотасынын эритмесин алуу үчүн суюктукту жаңы центрифуга түтүгүнө этияттык менен которуңуз.
9. Нуклеин кислотасынын эритмесин кыска мөөнөткө сактоо үчүн -20°C жана узак мөөнөткө сактоо үчүн -80°C температурада сактоого болот.
Эскертүүлөр
1. Бул комплекттеги ар кандай буферлердин курамында гуанидин туздары бар. Коопсуздугуңуз жана ден соолугуңуз үчүн, лабораториялык халат жана бир жолу колдонулуучу кол кап кийиңиз. Коопсуздуктун стандарттык сактык чараларына ылайык иштеңиз. Буфердин териге, көзгө жана былжыр челге тийүүсүнө жол бербеңиз. Эгер андай болуп калса, дароо көп суу менен жууп, медициналык жардамга кайрылыңыз.
2. Эгерде эритме чөкмө болуп калса, колдонуудан мурун чөкмө толугу менен эригенге чейин аны 30°C сууга чөмүлтүү керек.
3. Эгерде магниттик мончоктун суспензиясы тоңуп калган болсо, аны колдонбоңуз.
4. Бул комплекттеги ар кандай буферлерде гуанидин туздары бар. Аларды тазалоо үчүн натрий гипохлорити сыяктуу кычкылдандыруучу дезинфекциялоочу каражаттарды колдонбоңуз, болбосо уулуу газдар бөлүнүп чыгат жана аларды медициналык калдыктар катары иштетүү керек.
5. Элюция учурунда магниттик мончоктордун калдыктары калышы мүмкүн. Үлгүлөрдү соруп алууда магниттик мончокторду дем алуудан алыс болуңуз.