Magnéitescht universellt viralt DNA/RNA Kit HYD521
De Magnetic Universal Viral DNA/RNA Kit ass gëeegent fir d'Extraktioun vu virale Nukleinsäure aus Vollblut oder zellfräie Kierperflëssegkeeten (wéi Serum, Plasma, Gehirnflëssegkeet, Nasen-/Pharynx-Tuben, Alveolarspülflëssegkeet, etc.). Dës Method benotzt d'Reinigungstechnologie vu Magnéitperlen, an et ass keng gëfteg Phenolchloroform-Extraktioun während dem Extraktiounsprozess erfuerderlech. Et ass sécher, net gëfteg a séier. Dat kritt Produkt kann direkt an der PCR, qPCR, der Sequenzéierung vun der zweeter Generatioun an aneren Experimenter benotzt ginn. Wann et mat automatiséierten Extraktiounsinstrumenter mat Magnéitperlen benotzt gëtt, kann eng héich Duerchgangsextraktioun vun Nukleinsäuren erreecht ginn.
Produktinformatiounen
| Komponenten | 48T |
| Lyse- a Bindungsléisung | 33 ml |
| Magnéitesch Perlensuspensioun | 1,1 ml |
| Wäschpuffer A | 40 ml |
| Wäschpuffer B | 80 ml |
| Elutiounsléisung | 10 ml |
| Proteinase K | 1,1 ml |
Lagerkonditiounen
Proteinase K soll bei 2~8℃ gelagert ginn an déi aner Zutaten solle bei Raumtemperatur gelagert ginn. D'Haltbarkeet ass 18 Méint.
Beispillbeschreiwung
1. Zutreffend Probentypen: Vollblut, Serum, Plasma, Zerebrospinalflëssegkeet, Nasen-/Pharynx-Tuben, Alveolarspülflëssegkeet an aner Proben.
2. Lagerung an Transport vu Proben: Proben kënnen direkt fir d'Tester benotzt ginn oder bei -70℃ oder manner fir d'Tester gelagert ginn. D'Lagerzäit ass 6 Méint. Widderholl Afréieren an Optaue soll vermeit ginn. Proben ginn duerch Kältekette transportéiert.
3. Ufuerderunge fir Afréieren an Optauen: Schnell Afréieren an Optauen, widderholl Afréieren an Optauen vermeiden.
Operatioun
Virum Experiment, kontrolléiert ob d'Léisung Nidderschlag huet an ob d'Magnéitperlen resuspendéiert kënne ginn.
1. Transferéiert 200~300 μL Prouf an en 1,5 mL Zentrifugröhrchen, füügt 600 μL Lysis- a Bindungsléisung, 20 μL Proteinase K an 20 μL Magnéitperlesuspension hannereneen derbäi a vortext 30 Sekonnen op héijer Geschwindegkeet. Inkubéiert bei 50℃ fir 5~7 Minutten. Wann den Thermostat keng Oszillatiounsfunktioun huet, vortext 3 Mol während der Inkubatiounsperiod, all Kéier fir 15 Sekonnen.
2. Op e Magnéitstativ mat 1,5 ml fir eng magnéitesch Trennung iwwerdroen, bis d'Léisung kloer an transparent ass, an d'Léisung ewechgeheien.
3. Füügt 700 μL Wäschpuffer A derbäi, vortexéiert 10 Sekonnen fir d'Magnéitperlen opzebriechen, an da bréngt d'Léisung op e Magnéitstativ fir eng magnéitesch Trennung bis se kloer ass, an entsuergt se dann.
4. Füügt 700 μL Wäschpuffer B derbäi, vortexéiert 10 Sekonnen fir d'Magnéitperlen opzebriechen, setzt d'Léisung op e Magnéitstativ fir eng magnéitesch Trennung, bis se kloer ass, an entsuergt d'Léisung.
5. Füügt nach eng Kéier 700 μL Wäschpuffer B derbäi, vortext 10 Sekonnen fir d'Magnéitperlen opzebriechen, setzt d'Léisung op e Magnéitstativ fir eng magnéitesch Trennung, bis se kloer ass, an entsuergt d'Léisung.
6. Kuerz zentrifugéieren fir Drëpsen op der Réierwand ze sammelen, op e Magnéitstativ fir d'Klärung setzen an déi reschtlech Flëssegkeet absorbéieren. 3-5 Minutte laang un der Loft dréchnen loossen.
Bemierkung: Ethanolrescht hemmt spéider Enzymreaktiounen, dofir sollt Dir sécher stellen, datt den Ethanol beim Dréchnen komplett verdampft. Net ze laang dréchnen, fir den spéideren Elutiounseffekt net ze beaflossen.
7. Füügt 40~100 μL Elutiounsléisung derbäi, vortexéiert mat héijer Geschwindegkeet fir 2~3 Minutten fir d'Magnéitperlen ze zerbriechen. Inkubéiert bei 60℃ fir 5 Minutten, da vortexéiert mat héijer Geschwindegkeet fir 60 Sekonnen.
8. Direkt Zentrifuge fir d'Flëssegkeet vum Réierdeckel opzefänken an an de Magnéitgestell ze transferéieren, bis d'Magnéitperlen komplett adsorbéiert sinn. Dann d'Flëssegkeet virsiichteg an en neit Zentrifugeröhrchen transferéieren, fir d'Nukleinsäureléisung ze kréien.
9. D'Nukleinsäureléisung kann bei -20°C fir Kuerzzäitlagerung a bei -80°C fir Langzäitlagerung gelagert ginn.
Notizen
1. Déi verschidde Puffer an dësem Kit enthalen Guanidinsalzer. Fir Är Sécherheet a Gesondheet, drot w.e.g. e Labormantel an Handschuesch fir ewechzegeheien. A behandelt d'Produkt no de Sécherheetsnormen. Loosst de Puffer net a Kontakt mat der Haut, den Aen an de Schleimhäute kommen. Wann et awer geschitt, spült direkt mat vill Waasser a sicht medizinesch Hëllef.
2. Wann d'Léisung ausfällt, muss se a Waasser bei 30℃ gewaschen ginn, bis de Nidderschlag komplett opgeléist ass, ier se benotzt gëtt.
3. Wann d'Magnéitperlesuspension agefruer ass, däerf se net benotzt ginn.
4. Déi verschidde Puffer an dësem Kit enthalen Guanidinsalzer. Benotzt keng oxidéierend Desinfektiounsmëttel wéi Natriumhypochlorit fir se ze behandelen, soss ginn gëfteg Gase fräigesat an dës mussen als medizineschen Offall behandelt ginn.
5. Et kënne wärend der Elutioun Reschter vu Magnéitperlen optrieden. Versicht d'Inhalatioun vu Magnéitperlen beim Aspiréiere vu Proben ze vermeiden.