ຊຸດ DNA/RNA ໄວຣັສທົ່ວໄປແມ່ເຫຼັກ HYD521
ຊຸດ DNA/RNA ໄວຣັດແບບແມ່ເຫຼັກສາກົນແມ່ນເໝາະສົມສຳລັບການສະກັດກົດນິວຄລີອິກຂອງໄວຣັດຈາກເລືອດທັງໝົດ ຫຼື ນ້ຳໃນຮ່າງກາຍທີ່ບໍ່ມີຈຸລັງ (ເຊັ່ນ: ເຊລັ່ມ, ພລາສມາ, ນ້ຳໃນສະໝອງ, ຜ້າເຊັດດັງ/ຄໍ, ນ້ຳລ້າງຖົງລົມ, ແລະອື່ນໆ). ວິທີການນີ້ໃຊ້ເທັກໂນໂລຢີການກັ່ນຕອງລູກປັດແມ່ເຫຼັກ, ແລະບໍ່ຕ້ອງການການສະກັດເອົາ phenol chloroform ທີ່ເປັນພິດໃນລະຫວ່າງຂະບວນການສະກັດເອົາ. ມັນປອດໄພ, ບໍ່ເປັນພິດ ແລະ ໄວ. ຜະລິດຕະພັນທີ່ໄດ້ຮັບສາມາດນຳໃຊ້ໂດຍກົງໃນ PCR, qPCR, ການຈັດລຳດັບລຸ້ນທີສອງ ແລະ ການທົດລອງອື່ນໆ. ເມື່ອໃຊ້ກັບເຄື່ອງມືສະກັດເອົາອັດຕະໂນມັດຂອງລູກປັດແມ່ເຫຼັກ, ສາມາດບັນລຸການສະກັດເອົາກົດນິວຄລີອິກທີ່ມີປະສິດທິພາບສູງ.
ຂໍ້ມູນຜະລິດຕະພັນ
| ສ່ວນປະກອບຕ່າງໆ | 48T |
| ນ້ຳຢາລະລາຍ ແລະ ການຜູກມັດ | 33 ມລ |
| ການລະງັບລູກປັດແມ່ເຫຼັກ | 1.1 ມລ |
| ບັຟເຟີລ້າງ A | 40 ມລ |
| ບັຟເຟີລ້າງ B | 80 ມລ |
| ນ້ຳຢາລະລາຍ | 10 ມລ |
| ໂປຣຕີນເນສ K | 1.1 ມລ |
ເງື່ອນໄຂການເກັບຮັກສາ
ໂປຣຕີນເນສ K ຄວນເກັບຮັກສາໄວ້ທີ່ອຸນຫະພູມ 2~8℃ ແລະສ່ວນປະກອບອື່ນໆຄວນເກັບຮັກສາໄວ້ທີ່ອຸນຫະພູມຫ້ອງ. ອາຍຸການເກັບຮັກສາແມ່ນ 18 ເດືອນ.
ຕົວຢ່າງລາຍລະອຽດ
1. ປະເພດຕົວຢ່າງທີ່ໃຊ້ໄດ້: ເລືອດທັງໝົດ, ເຊຣັມ, ພລາສມາ, ນ້ຳໃນສະໝອງ, ຜ້າເຊັດດັງ/ຄໍ, ນ້ຳລ້າງຖົງລົມ ແລະ ຕົວຢ່າງອື່ນໆ.
2. ການເກັບຮັກສາ ແລະ ການຂົນສົ່ງຕົວຢ່າງ: ຕົວຢ່າງສາມາດໃຊ້ສຳລັບການທົດສອບທັນທີ ຫຼື ເກັບຮັກສາໄວ້ທີ່ອຸນຫະພູມ -70°C ຫຼື ຕ່ຳກວ່າສຳລັບການທົດສອບ. ໄລຍະເວລາເກັບຮັກສາແມ່ນ 6 ເດືອນ. ຄວນຫຼີກລ່ຽງການແຊ່ແຂງ ແລະ ລະລາຍຊ້ຳໆ. ຕົວຢ່າງຈະຖືກຂົນສົ່ງໂດຍລະບົບຕ່ອງໂສ້ເຢັນ.
3. ຂໍ້ກຳນົດໃນການແຊ່ແຂງ-ລະລາຍ: ການແຊ່ແຂງ ແລະ ລະລາຍຢ່າງໄວວາ, ຫຼີກລ່ຽງການແຊ່ແຂງ ແລະ ລະລາຍຊ້ຳແລ້ວຊ້ຳອີກ.
ການດຳເນີນງານ
ກ່ອນການທົດລອງ, ໃຫ້ກວດເບິ່ງວ່າສານລະລາຍມີນ້ຳຕົກຕາດຫຼືບໍ່ ແລະ ລູກປັດແມ່ເຫຼັກສາມາດລະລາຍຄືນໃໝ່ໄດ້ຫຼືບໍ່.
1. ຍ້າຍຕົວຢ່າງ 200~300 μL ໃສ່ທໍ່ centrifuge ຂະໜາດ 1.5 mL, ຕື່ມນ້ຳຢາ Lysis and Binding Solution 600 μL, Proteinase K 20 μL, ແລະ ນ້ຳຢາລະລາຍແມ່ເຫຼັກ 20 μL ຕາມລຳດັບ, ແລະ vortex ດ້ວຍຄວາມໄວສູງເປັນເວລາ 30 ວິນາທີ. ບົ່ມທີ່ອຸນຫະພູມ 50℃ ເປັນເວລາ 5~7 ນາທີ. ຖ້າເຄື່ອງຄວບຄຸມອຸນຫະພູມບໍ່ມີໜ້າທີ່ການສັ່ນ, ໃຫ້ vortex 3 ຄັ້ງໃນໄລຍະເວລາບົ່ມ, ແຕ່ລະຄັ້ງເປັນເວລາ 15 ວິນາທີ.
2. ຍ້າຍໄປໃສ່ຖາດແມ່ເຫຼັກຂະໜາດ 1.5 ມລ ເພື່ອແຍກສານແມ່ເຫຼັກຈົນກວ່າສານລະລາຍຈະໃສ ແລະ ໂປ່ງໃສ, ແລະ ຖິ້ມສານລະລາຍນັ້ນ.
3. ຕື່ມ wash buffer A 700 μL, ໝຸນວຽນເປັນເວລາ 10 ວິນາທີເພື່ອແຍກລູກປັດແມ່ເຫຼັກ, ແລະຈາກນັ້ນຍ້າຍໄປໃສ່ບ່ອນຕັ້ງແມ່ເຫຼັກເພື່ອແຍກແມ່ເຫຼັກຈົນກວ່ານ້ຳຢາຈະໃສ, ແລະຖິ້ມນ້ຳຢາ.
4. ຕື່ມນ້ຳຢາລ້າງ buffer B 700 μL, ໝຸນວຽນເປັນເວລາ 10 ວິນາທີເພື່ອແຍກລູກປັດແມ່ເຫຼັກ, ຍ້າຍໄປໃສ່ບ່ອນຕັ້ງແມ່ເຫຼັກເພື່ອແຍກແມ່ເຫຼັກຈົນກວ່ານ້ຳຢາຈະໃສ, ແລະ ຖິ້ມນ້ຳຢາ.
5. ຕື່ມ wash buffer B 700 μL ອີກເທື່ອໜຶ່ງ, ໝຸນວຽນເປັນເວລາ 10 ວິນາທີເພື່ອແຍກລູກປັດແມ່ເຫຼັກ, ຍ້າຍໄປໃສ່ບ່ອນຕັ້ງແມ່ເຫຼັກເພື່ອແຍກແມ່ເຫຼັກຈົນກວ່າສານລະລາຍຈະໃສ, ແລະ ຖິ້ມສານລະລາຍ.
6. ປั่นແຍກສ່ວນເປັນເວລາສັ້ນໆເພື່ອເກັບຢອດນ້ຳໃສ່ຝາທໍ່, ຍ້າຍໄປໃສ່ຂາຕັ້ງແມ່ເຫຼັກເພື່ອຄວາມກະຈ່າງໃສ, ແລະ ດູດຊຶມນ້ຳທີ່ເຫຼືອ. ອົບແຫ້ງດ້ວຍອາກາດປະມານ 3-5 ນາທີ.
ໝາຍເຫດ: ສານຕົກຄ້າງຂອງເອທານອນຈະຍັບຍັ້ງປະຕິກິລິຍາຂອງເອນໄຊມ໌ຕໍ່ມາ, ສະນັ້ນ ໃຫ້ແນ່ໃຈວ່າເອທານອນລະເຫີຍໝົດເມື່ອແຫ້ງ. ຢ່າແຫ້ງດົນເກີນໄປເພື່ອຫຼີກເວັ້ນການສົ່ງຜົນກະທົບຕໍ່ຜົນກະທົບຂອງການລະລາຍຕໍ່ມາ.
7. ຕື່ມສານລະລາຍ Elution 40~100 μL, ປັ່ນດ້ວຍຄວາມໄວສູງເປັນເວລາ 2~3 ນາທີເພື່ອແຍກລູກປັດແມ່ເຫຼັກ. ບົ່ມຢູ່ທີ່ 60℃ ເປັນເວລາ 5 ນາທີ, ຈາກນັ້ນປັ່ນດ້ວຍຄວາມໄວສູງເປັນເວລາ 60 ວິນາທີ.
8. ໃຊ້ເຄື່ອງປั่นແຍກທັນທີເພື່ອເກັບເອົາຂອງແຫຼວຈາກຝາປິດທໍ່ ແລະ ຍ້າຍມັນໄປໃສ່ຊັ້ນແມ່ເຫຼັກຈົນກວ່າລູກປັດແມ່ເຫຼັກຈະຖືກດູດຊຶມໝົດ. ຈາກນັ້ນ, ຄ່ອຍໆຍ້າຍຂອງແຫຼວໄປໃສ່ທໍ່ປั่นແຍກໃໝ່ເພື່ອໃຫ້ໄດ້ສານລະລາຍກົດນິວເຄຼຍອິກ.
9. ສານລະລາຍກົດນິວເຄຼຍອິກສາມາດເກັບຮັກສາໄວ້ທີ່ -20°C ສຳລັບການເກັບຮັກສາໄລຍະສັ້ນ ແລະ -80°C ສຳລັບການເກັບຮັກສາໄລຍະຍາວ.
ໝາຍເຫດ
1. ບັຟເຟີຕ່າງໆໃນຊຸດນີ້ມີເກືອກວານີດີນ. ເພື່ອຄວາມປອດໄພ ແລະ ສຸຂະພາບຂອງທ່ານ, ກະລຸນາໃສ່ເສື້ອຄຸມຫ້ອງທົດລອງ ແລະ ຖົງມືໃຊ້ແລ້ວຖິ້ມ. ແລະ ຈັບຕາມມາດຕະຖານຄວາມປອດໄພ. ຢ່າໃຫ້ບັຟເຟີສຳຜັດກັບຜິວໜັງ, ຕາ ແລະ ເຍື່ອເມືອກ. ຖ້າມັນເກີດຂຶ້ນ, ກະລຸນາລ້າງອອກທັນທີດ້ວຍນ້ຳປະລິມານຫຼາຍ ແລະ ໄປພົບແພດ.
2. ຖ້າສານລະລາຍຕົກຕະກອນ, ຕ້ອງແຊ່ນ້ຳໃນນ້ຳ 30°C ຈົນກວ່າສານລະລາຍຈະລະລາຍໝົດກ່ອນນຳໃຊ້.
3. ຖ້ານ້ຳຢາລະງັບແມ່ເຫຼັກແຂງຕົວ, ຢ່າໃຊ້ມັນ.
4. ບັຟເຟີຕ່າງໆໃນຊຸດນີ້ປະກອບດ້ວຍເກືອກວານີດີນ. ຢ່າໃຊ້ນໍ້າຢາຂ້າເຊື້ອທີ່ຜຸພັງເຊັ່ນ: ໂຊດຽມໄຮໂປຄລໍໄຣ ເພື່ອກຳຈັດສິ່ງເສດເຫຼືອເຫຼົ່ານັ້ນ, ຖ້າບໍ່ດັ່ງນັ້ນອາຍແກັສພິດຈະຖືກປ່ອຍອອກມາ ແລະ ຕ້ອງໄດ້ຮັບການກຳຈັດຄືກັບສິ່ງເສດເຫຼືອທາງການແພດ.
5. ອາດຈະມີລູກປັດແມ່ເຫຼັກຕົກຄ້າງໃນລະຫວ່າງການລະລາຍ. ພະຍາຍາມຫຼີກລ່ຽງການສູດດົມລູກປັດແມ່ເຫຼັກເຂົ້າເມື່ອດູດຕົວຢ່າງ.