2× PCR premikss (ar krāsvielu) HYA442
2× PCR Master Mix satur Taq DNS polimerāzi, dNTP un citas PCR nepieciešamās sastāvdaļas. Master Mix ir stabils 3 mēnešus 4 °C temperatūrā ar mūsu pielāgotajiem stabilizatoriem. Iepriekš sagatavotais šķīdums ir optimizēts parastajai PCR un ir gatavs lietošanai, pievienojot DNS veidni un praimerus. PCR produktus var tieši ielādēt elektroforēzei ar iepriekš ielādētu bromfenola zilo krāsvielu. Amplificētie produkti satur 3'-dA izaugumu un tos var viegli klonēt T vektorā. 2× PCR Master Mix vienkāršo PCR procedūru un samazina piesārņojumu.
Sastāvdaļas
| Sastāvdaļas | 1. izmērs | 2. izmērs | 3. izmērs |
| 2× PCR premikss (ar krāsvielu) | 5 ml | 1 ml × 15 | 1 ml × 50 |
Uzglabāšana
Uzglabāt -20°C temperatūrā 2 gadus.
Norādījumi
1. Reakcijas sistēma
| Sastāvdaļas | Apjoms |
| 2× PCR premikss (ar krāsvielu) | 25 μL |
| Tiešais gruntējums (10 μM) | 2 µL |
| Reversais gruntējums (10 μM) | 2 µL |
| DNS veidne* | Mainīgais |
| ddH2THE | Līdz 50 µL |
*Veidnes izmantošana: 50-200 ng genoma DNS; 0,1-10 ng plazmīdas DNS
2. Reakcijas programma
| Solis | Temperatūra | Laiks | Cikli |
| Sākotnējā denaturācija | 94 ℃ | 5 minūtes | 1 |
| Denaturācija | 94 ℃ | 30 sekundes | 35 |
| Atkvēlināšana | 50–60 ℃ | 30 sekundes | |
| Paplašinājums | 72 ℃ | 30–60 sek./kb | |
| Galīgais pagarinājums | 72 ℃ | 10 minūtes | 1 |
| Turiet | 4 ℃ | - | 1 |
1. Mg2+ koncentrācija: Šis produkts satur 3 mM MgCl2, piemērots lielākajai daļai PCR reakciju.
2. Atkvēlināšanas temperatūra: Lūdzu, skatiet gruntskrāsas teorētisko Tm vērtību. Atkvēlināšanas temperatūru var iestatīt par 2–5 ℃ zemāku nekā gruntskrāsas teorētisko vērtību.
3. Pagarinājuma laiks: Molekulārajai identifikācijai ieteicams 30 sekundes/kb. Gēnu klonēšanai ieteicams 60 sekundes/kb.
Piezīmes
1. PCR produkti ar 2× PCR Master Mix nav piemēroti poliakrilamīda gela elektroforēzei.
2. Jūsu drošības un veselības labad, lūdzu, darba laikā valkājiet laboratorijas halātus un vienreizējās lietošanas cimdus.
3. To izmanto TIKAI pētniecības nolūkos!