Magnētisks universāls vīrusu DNS/RNS komplekts HYD521
Magnētiskais universālais vīrusu DNS/RNS komplekts ir piemērots vīrusu nukleīnskābju ekstrakcijai no pilnasinīm vai bezšūnu ķermeņa šķidrumiem (piemēram, seruma, plazmas, cerebrospinālā šķidruma, deguna/rīkles uztriepes, alveolu skalošanas šķidruma utt.). Šī metode izmanto magnētisko lodīšu attīrīšanas tehnoloģiju, un ekstrakcijas procesā nav nepieciešama toksiska fenola hloroforma ekstrakcija. Tā ir droša, netoksiska un ātra. Iegūto produktu var tieši izmantot PCR, qPCR, otrās paaudzes sekvencēšanā un citos eksperimentos. Izmantojot kopā ar magnētisko lodīšu automatizētām ekstrakcijas ierīcēm, var panākt augstas caurlaidības nukleīnskābju ekstrakciju.
Produkta informācija
| Sastāvdaļas | 48T |
| Līzes un saistīšanas šķīdums | 33 ml |
| Magnētiskā pērlīšu piekare | 1,1 ml |
| Mazgāšanas buferis A | 40 ml |
| Mazgāšanas buferis B | 80 ml |
| Eluēšanas šķīdums | 10 ml |
| Proteināze K | 1,1 ml |
Uzglabāšanas apstākļi
Proteināze K jāuzglabā 2–8 °C temperatūrā, bet pārējās sastāvdaļas – istabas temperatūrā. Derīguma termiņš ir 18 mēneši.
Parauga apraksts
1. Piemērojamie paraugu veidi: pilnas asinis, serums, plazma, cerebrospinālais šķidrums, deguna/rīkles uztriepes, alveolu skalošanas šķidrums un citi paraugi.
2. Paraugu uzglabāšana un transportēšana: Paraugus var izmantot testēšanai nekavējoties vai uzglabāt testēšanai -70 ℃ vai zemākā temperatūrā. Uzglabāšanas periods ir 6 mēneši. Jāizvairās no atkārtotas sasaldēšanas un atkausēšanas. Paraugi tiek transportēti, izmantojot aukstuma ķēdi.
3. Saldēšanas un atkausēšanas prasības: Ātra sasaldēšana un atkausēšana, jāizvairās no atkārtotas sasaldēšanas un atkausēšanas.
Darbība
Pirms eksperimenta pārbaudiet, vai šķīdumā ir nogulsnes un vai magnētiskās lodītes var atkārtoti suspendēt.
1. Pārnesiet 200–300 μL parauga uz 1,5 ml centrifūgas mēģeni, secīgi pievienojiet 600 μL līzes un saistīšanas šķīduma, 20 μL proteināzes K un 20 μL magnētisko lodīšu suspensijas un kratiet lielā ātrumā 30 sekundes. Inkubējiet 50 °C temperatūrā 5–7 minūtes. Ja termostatam nav svārstību funkcijas, inkubācijas periodā kratiet 3 reizes, katru reizi 15 sekundes.
2. Pārvietojiet uz 1,5 ml magnētisko statīvu magnētiskai atdalīšanai, līdz šķīdums ir dzidrs un caurspīdīgs, un izmetiet šķīdumu.
3. Pievienojiet 700 μL mazgāšanas bufera A, 10 sekundes kratiet, lai sadalītu magnētiskās lodītes, un pēc tam pārvietojiet uz magnētisko statīvu magnētiskai atdalīšanai, līdz šķīdums ir dzidrs, un izmetiet šķīdumu.
4. Pievienojiet 700 μL mazgāšanas buferšķīduma B, 10 sekundes kratiet, lai sadalītu magnētiskās lodītes, pārvietojiet uz magnētisko statīvu magnētiskai atdalīšanai, līdz šķīdums ir dzidrs, un izmetiet šķīdumu.
5. Vēlreiz pievienojiet 700 μL mazgāšanas buferšķīduma B, 10 sekundes kratiet, lai sadalītu magnētiskās lodītes, pārvietojiet uz magnētisko statīvu magnētiskai atdalīšanai, līdz šķīdums ir dzidrs, un izmetiet šķīdumu.
6. Īsi centrifugējiet, lai savāktu pilienus uz mēģenes sieniņas, pārvietojiet uz magnētisko statīvu dzidrināšanai un absorbējiet atlikušo šķidrumu. Žāvējiet gaisā 3–5 minūtes.
Piezīme: Etanola atlikumi kavēs turpmākās enzīmu reakcijas, tāpēc pārliecinieties, ka žāvēšanas laikā etanols pilnībā iztvaiko. Nežāvējiet pārāk ilgi, lai neietekmētu turpmāko eluēšanas efektu.
7. Pievienojiet 40–100 μL eluēšanas šķīduma, kratiet lielā ātrumā 2–3 minūtes, lai sadalītu magnētiskās lodītes. Inkubējiet 60 °C temperatūrā 5 minūtes, pēc tam kratiet lielā ātrumā 60 sekundes.
8. Tūlītēja centrifugēšana ļauj savākt šķidrumu no mēģenes vāciņa un pārvietot to uz magnētisko statīvu, līdz magnētiskās lodītes ir pilnībā adsorbētas. Pēc tam uzmanīgi pārvietojiet šķidrumu uz jaunu centrifūgas mēģeni, lai iegūtu nukleīnskābju šķīdumu.
9. Nukleīnskābju šķīdumu īslaicīgi var uzglabāt -20°C temperatūrā un ilgstoši -80°C temperatūrā.
Piezīmes
1. Šajā komplektā esošie dažādie buferšķīdumi satur guanidīna sāļus. Jūsu drošības un veselības labad, lūdzu, valkājiet laboratorijas halātu un vienreizējās lietošanas cimdus. Un rīkojieties saskaņā ar drošības standarta piesardzības pasākumiem. Neļaujiet buferšķīdumam nonākt saskarē ar ādu, acīm un gļotādām. Ja tas notiek, nekavējoties nomazgājiet ar lielu daudzumu ūdens un meklējiet medicīnisko palīdzību.
2. Ja šķīdums nogulsnējas, tas pirms lietošanas jāiegremdē 30 ℃ karstā ūdenī, līdz nogulsnes ir pilnībā izšķīdušas.
3. Ja magnētisko lodīšu suspensija ir sasalusi, to nelietojiet.
4. Šajā komplektā esošie dažādie buferšķīdumi satur guanidīna sāļus. To apstrādei neizmantojiet oksidējošus dezinfekcijas līdzekļus, piemēram, nātrija hipohlorītu, pretējā gadījumā izdalīsies toksiskas gāzes, un tie jāapstrādā kā medicīniskie atkritumi.
5. Eluācijas laikā var būt palikušas magnētiskās lodītes. Centieties izvairīties no magnētisko lodīšu ieelpošanas, aspirējot paraugus.