Kitapo ADN/ARN Virosy Magnetika Universal HYD521
Ny Kitapo ADN/ARN Magnetika Universal Viral dia mety amin'ny fanesorana asidra nokleika viraliny avy amin'ny ra manontolo na tsiranoka tsy misy sela (toy ny serum, plasma, tsiranoka cerebrospinal, swab orona/pharyngeal, tsiranoka lavage alveolar, sns.). Ity fomba ity dia mampiasa teknolojia fanadiovana vakana magnetika, ary tsy ilaina ny fitrandrahana phenol chloroform misy poizina mandritra ny dingana fitrandrahana. Azo antoka, tsy misy poizina ary haingana izy io. Ny vokatra azo dia azo ampiasaina mivantana amin'ny PCR, qPCR, sequencing taranaka faharoa ary andrana hafa. Rehefa ampiasaina miaraka amin'ny fitaovana fitrandrahana mandeha ho azy amin'ny vakana magnetika, dia azo tratrarina ny fitrandrahana asidra nokleika avo lenta.
Fampahalalana momba ny vokatra
| singa | 48T |
| Vahaolana momba ny lysis sy ny fifamatorana | 33 ml |
| Fihantonan'ny vakana magnetika | 1.1 mL |
| Fanasana buffer A | 40 ml |
| Fanasana buffer B | 80 ml |
| Vahaolana elution | 10 ml |
| Proteinase K | 1.1 mL |
Fepetra fitahirizana
Tokony hotehirizina amin'ny 2~8℃ ny Proteinase K ary ny akora hafa dia tokony hotehirizina amin'ny mari-pana ao an-trano. 18 volana ny faharetan'ny fitehirizana azy.
Famaritana ohatra
1. Karazana santionany azo ampiasaina: ra manontolo, sérum, plasma, tsiranoka cerebrospinal, swab orona/faryngeal, tsiranoka lavage alveolar ary santionany hafa.
2. Fitehirizana sy fitaterana ny santionany: Azo ampiasaina hanaovana fitiliana avy hatrany ny santionany na tehirizina amin'ny -70℃ na latsaka ho an'ny fitiliana. Enim-bolana ny fe-potoana fitahirizana. Tokony hohalavirina ny fampangatsiahana sy ny fanalefahana matetika. Entina amin'ny alalan'ny rojo mangatsiaka ny santionany.
3. Fepetra takiana amin'ny fampangatsiahana sy ny fandroahana: fampangatsiahana sy fandroahana haingana, fadio ny fampangatsiahana sy fandroahana miverimberina.
hetsika
Alohan'ny hanaovana ny andrana, jereo raha misy rotsakorana ao amin'ny vahaolana ary raha azo averina mihantona ireo vakana andriamby.
1. Afindrao ao anaty fantsona centrifuge 1.5 mL ny santionany 200~300 μL, ampio 600 μL ny Lysis and Binding Solution, 20 μL ny Proteinase K, ary 20 μL ny magnetic bead suspension mifanesy, ary ahetsiketsika amin'ny hafainganam-pandeha avo lenta mandritra ny 30 segondra. Avela hilona amin'ny 50℃ mandritra ny 5~7 minitra. Raha tsy manana fiasa oscillation ny thermostat, dia ahetsiketsika in-3 mandritra ny fe-potoana fikolokoloana, isaky ny mandeha mandritra ny 15 segondra.
2. Afindrao ao anaty fitoeran-javatra magnetika 1.5 mL mba hanasarahana magnetika mandra-pahazava sy mangarahara ny vahaolana, ary ariana ny vahaolana.
3. Ampio 700 μL ny "wash buffer" A, ahetsiketsika mandritra ny 10 segondra mba hanapotehana ireo vakana magnetika, ary avy eo afindra amin'ny fitoeran-javatra magnetika mba hanasarahana magnetika mandra-pahamazava ny vahaolana, ary ariana ny vahaolana.
4. Ampio 700 μL ny "wash buffer" B, ahetsiketsika mandritra ny 10 segondra mba hanapotehana ireo vakana magnetika, afindrao ao anaty fitoeran-javatra magnetika mba hanasarahana magnetika mandra-pahamazava ny vahaolana, ary ariana ny vahaolana.
5. Ampio indray ny "wash buffer" B 700 μL, ahetsiketsika mandritra ny 10 segondra mba hanapotehana ireo vakana magnetika, afindrao amin'ny fitoeran-javatra magnetika mba hanasarahana magnetika mandra-pahamazava ny vahaolana, ary ariana ny vahaolana.
6. Arotsaho vetivety ny rano mba hanangonana ireo ranon-javatra eo amin'ny rindrin'ny fantsona, afindra amin'ny fitoeran-javatra magnetika mba hanadiovana azy, ary raiso ny rano sisa tavela. Avela ho maina amin'ny rivotra mandritra ny 3-5 minitra.
Fanamarihana: Hanakana ny fiasan'ny anzima manaraka ny sisa tavela amin'ny etanol, koa ataovy izay hahazoana antoka fa miempo tanteraka ny etanol rehefa maina. Aza maina ela loatra mba tsy hisy fiantraikany amin'ny vokatry ny fanadiovana manaraka.
7. Ampio 40~100 μL amin'ny vahaolana Elution, ahetsiketsika amin'ny hafainganam-pandeha ambony mandritra ny 2~3 minitra mba hanapotehana ireo vakana magnetika. Avela hilona amin'ny 60℃ mandritra ny 5 minitra, avy eo ahetsiketsika amin'ny hafainganam-pandeha ambony mandritra ny 60 segondra.
8. Atsobohy avy hatrany ny "centrifuge" mba hanangonana ny ranon-javatra avy amin'ny sarom-fantsona ary afindrao any amin'ny fitoeran-javatra magnetika mandra-pidiran'ireo vakana magnetika tanteraka. Avy eo dia afindrao moramora any amin'ny fantsona "centrifuge" vaovao ny ranon-javatra mba hahazoana ny vahaolana asidra nokleika.
9. Azo tehirizina amin'ny -20°C ny vahaolana asidra nokleika ho an'ny fitahirizana fohy ezaka ary -80°C ho an'ny fitahirizana maharitra.
-tsoratra
1. Ireo "buffer" isan-karazany ato amin'ity kitapo ity dia misy sira guanidine. Ho fiarovana sy fahasalamanao, azafady mba manaova akanjo laboratoara sy fonon-tanana azo ariana. Ary tantano araka ny fepetra fiarovana. Aza avela hikasika ny hoditra, ny maso ary ny fonon-taolana ny "buffer". Raha sendra izany dia sasao avy hatrany amin'ny rano be dia be ary mitadiava fitsaboana.
2. Raha mivaingana ny rano dia mila kobanina amin'ny rano 30°C mandra-pahalevon'ny rano tanteraka alohan'ny hampiasana azy.
3. Raha mivaingana ny vakana magnetika dia aza ampiasaina.
4. Ireo "buffer" isan-karazany ato amin'ity kitapo ity dia misy sira guanidine. Aza mampiasa fanafody famonoana otrikaretina toy ny sodium hypochlorite hitsaboana azy ireo, raha tsy izany dia hivoaka ny entona misy poizina ary tsy maintsy raisina ho toy ny fako ara-pitsaboana izy ireo.
5. Mety hisy vakana magnetika sisa tavela mandritra ny fanesorana ny rano. Aza mifoka vakana magnetika rehefa misintona santionany.