Магнетен универзален комплет за вирусна ДНК/РНК HYD521
Магнетниот универзален комплет за вирална ДНК/РНК е погоден за екстракција на вирална нуклеинска киселина од цела крв или телесни течности без клетки (како што се серум, плазма, цереброспинална течност, назални/фарингеални брисеви, алвеоларна лаважна течност итн.). Овој метод користи технологија за прочистување со магнетни зрна и не е потребна токсична екстракција со фенол-хлороформ за време на процесот на екстракција. Безбеден е, нетоксичен и брз. Добиениот производ може директно да се користи во PCR, qPCR, секвенционирање од втора генерација и други експерименти. Кога се користи со инструменти за автоматска екстракција со магнетни зрна, може да се постигне екстракција на нуклеински киселини со висок проток.
Информации за производот
| Компоненти | 48Т |
| Раствор за лиза и врзување | 33 мл |
| Суспензија од магнетни перли | 1,1 мл |
| Пуфер за перење А | 40 мл |
| Пуфер за перење Б | 80 мл |
| Раствор за елуирање | 10 мл |
| Протеиназа К | 1,1 мл |
Услови за складирање
Протеиназата К треба да се чува на 2~8℃, а другите состојки треба да се чуваат на собна температура. Рокот на траење е 18 месеци.
Пример опис
1. Применливи типови примероци: цела крв, серум, плазма, цереброспинална течност, назални/фарингеални брисеви, алвеоларна лаважна течност и други примероци.
2. Складирање и транспорт на примероци: Примероците може да се користат за тестирање веднаш или да се складираат на -70℃ или пониска температура за тестирање. Периодот на складирање е 6 месеци. Треба да се избегнува повторено замрзнување и одмрзнување. Примероците се транспортираат преку ладен ланец.
3. Барања за замрзнување и одмрзнување: Брзо замрзнување и одмрзнување, избегнувајте постојано замрзнување и одмрзнување.
Операција
Пред експериментот, проверете дали растворот има талог и дали магнетните зрнца можат да се ресуспендираат.
1. Пренесете 200~300 μL од примерокот во центрифугална епрувета од 1,5 mL, додадете 600 μL раствор за лиза и врзување, 20 μL протеиназа К и 20 μL суспензија од магнетни зрна по ред и мешајте со голема брзина 30 секунди. Инкубирајте на 50℃ 5~7 минути. Доколку термостатот нема функција за осцилација, мешајте со вртење 3 пати за време на периодот на инкубација, секој пат по 15 секунди.
2. Префрлете го растворот во магнетен сталак од 1,5 mL за магнетно одвојување додека не стане бистар и проѕирен, а потоа фрлете го растворот.
3. Додадете 700 μL пуфер за миење А, мешајте 10 секунди за да ги разбиете магнетните зрна, а потоа префрлете го растворот на магнетен држач за магнетно одвојување додека растворот не стане бистар, и фрлете го.
4. Додадете 700 μL пуфер за миење Б, мешајте во вртежен момент 10 секунди за да се разбијат магнетните зрна, префрлете го на магнетен држач за магнетно одвојување додека растворот не стане бистар и фрлете го растворот.
5. Повторно додадете 700 μL пуфер за миење Б, мешајте во вртежен момент 10 секунди за да ги разбиете магнетните зрна, префрлете го растворот во магнетен држач за магнетно одвојување додека растворот не стане бистар и фрлете го.
6. Центрифугирајте накратко за да се соберат капките на ѕидот на епруветата, префрлете на магнетен држач за бистрење и апсорбирајте ја преостанатата течност. Сушете на воздух 3-5 минути.
Забелешка: Остатокот од етанол ќе ги инхибира последователните ензимски реакции, затоа проверете дали етанолот целосно испари при сушењето. Не сушете предолго за да избегнете влијание врз последователниот ефект на елуирање.
7. Додадете 40~100 μL раствор за елуирање, мешајте со голема брзина 2~3 минути за да ги разбиете магнетните перли. Инкубирајте на 60℃ 5 минути, а потоа мешајте со голема брзина 60 секунди.
8. Инстант центрифугирајте за да ја соберете течноста од капачето на тубата и префрлете ја на магнетната решетка додека магнетните зрна не се целосно адсорбираат. Потоа внимателно префрлете ја течноста во нова центрифугална цевка за да го добиете растворот на нуклеинска киселина.
9. Растворот на нуклеинска киселина може да се чува на -20°C за краткорочно складирање и на -80°C за долгорочно складирање.
Белешки
1. Различните пуфери во овој комплет содржат гванидински соли. За ваша безбедност и здравје, ве молиме носете лабораториски мантил и ракавици за еднократна употреба. И ракувајте според безбедносните стандарди. Не дозволувајте пуферот да дојде во контакт со кожата, очите и мукозните мембрани. Доколку тоа се случи, веднаш измијте со многу вода и побарајте медицинска помош.
2. Доколку растворот се таложи, треба да се потопи во вода од 30°C додека талогот целосно не се раствори пред употреба.
3. Ако суспензијата од магнетни зрна е замрзната, не ја користете.
4. Различните пуфери во овој комплет содржат гванидински соли. Не користете оксидирачки средства за дезинфекција како што е натриум хипохлорит за нивно третирање, во спротивно ќе се ослободат токсични гасови и тие мора да се третираат како медицински отпад.
5. Може да има преостанати магнетни зрна за време на елуирањето. Обидете се да избегнете вдишување на магнетни зрна при аспирирање на примероци.