2× Pracampuran PCR （dengan Pewarna） HYA442
Campuran Induk PCR 2× mengandungi Taq DNA Polymerase, dNTP dan komponen lain yang diperlukan oleh PCR. Campuran Induk stabil selama 3 bulan pada suhu 4℃ dengan penstabil tersuai kami. Larutan pra-campuran dioptimumkan untuk PCR konvensional dan sedia untuk digunakan dengan menambah templat DNA dan primer. Produk PCR boleh dimuatkan terus untuk elektroforesis dengan pewarna biru bromofenol yang telah dimuatkan terlebih dahulu. Produk yang diperkuatkan mengandungi penonjolan 3'-dA dan boleh diklon dengan mudah ke dalam vektor T. Campuran Induk PCR 2× memudahkan prosedur PCR dan mengurangkan pencemaran.
Komponen
| Komponen | Saiz-1 | Saiz-2 | Saiz-3 |
| 2× Pracampuran PCR (dengan Pewarna) | 5mL | 1 mL × 15 | 1 mL × 50 |
Penyimpanan
Simpan pada suhu -20°C selama 2 tahun.
Arahan
1. Sistem Reaksi
| Komponen | Kelantangan |
| 2× Pracampuran PCR (dengan Pewarna) | 25 uL |
| Primer Hadapan (10 μM) | 2 µL |
| Primer Songsang (10 μM) | 2 µL |
| Templat DNA* | Pembolehubah |
| ddH2THE | Sehingga 50 µL |
*Penggunaan templat: 50-200 ng DNA genomik; 0.1-10 ng DNA plasmid
2. Program Reaksi
| Langkah | Suhu | Masa | Kitaran |
| Denaturasi Awal | 94 ℃ | 5 minit | 1 |
| Denaturasi | 94 ℃ | 30 saat | 35 |
| Penyepuhlindapan | 50-60 ℃ | 30 saat | |
| Pelanjutan | 72 ℃ | 30-60 saat/kb | |
| Pelanjutan Akhir | 72 ℃ | 10 minit | 1 |
| Tahan | 4 ℃ | - | 1 |
1. Mg2+ kepekatan: Produk ini mengandungi 3 mM MgCl2, sesuai untuk kebanyakan tindak balas PCR.
2. Suhu penyepuhlindapan: Sila rujuk nilai Tm teori primer. Suhu penyepuhlindapan boleh ditetapkan kepada 2-5℃ lebih rendah daripada nilai teori primer.
3. Masa lanjutan: Untuk pengenalpastian molekul, 30 saat/kb disyorkan. Untuk pengklonan gen, 60 saat/kb disyorkan.
Nota
1. Produk PCR dengan 2× PCR Master Mix tidak sesuai untuk elektroforesis gel poliakrilamida.
2. Demi keselamatan dan kesihatan anda, sila pakai kot makmal dan sarung tangan pakai buang semasa operasi.
3. Ia hanya digunakan untuk tujuan penyelidikan SAHAJA!