၂ × PCR Premix (ဆိုးဆေးပါဝင်သည်) HYA442
၂× PCR Master Mix တွင် Taq DNA Polymerase၊ dNTP များနှင့် အခြား PCR လိုအပ်သော အစိတ်အပိုင်းများ ပါဝင်သည်။ Master Mix သည် ကျွန်ုပ်တို့၏ စိတ်ကြိုက်ပြုလုပ်ထားသော stabilizer များဖြင့် ၄ ဒီဂရီစင်တီဂရိတ်တွင် ၃ လကြာ တည်ငြိမ်သည်။ pre-mix solution ကို ရိုးရာ PCR အတွက် အကောင်းဆုံးဖြစ်အောင် ပြုလုပ်ထားပြီး DNA template နှင့် primer များထည့်ခြင်းဖြင့် အသုံးပြုရန် အသင့်ဖြစ်သည်။ PCR ထုတ်ကုန်များကို ကြိုတင်ထည့်သွင်းထားသော bromophenol blue dye ဖြင့် electrophoresis အတွက် တိုက်ရိုက်ထည့်သွင်းနိုင်သည်။ amplified ထုတ်ကုန်များတွင် 3 '-dA protrusion ပါဝင်ပြီး T vector ထဲသို့ အလွယ်တကူ clone လုပ်နိုင်သည်။ ၂× PCR Master Mix သည် PCR လုပ်ထုံးလုပ်နည်းကို ရိုးရှင်းစေပြီး ညစ်ညမ်းမှုကို လျှော့ချပေးသည်။
အစိတ်အပိုင်းများ
| အစိတ်အပိုင်းများ | အရွယ်အစား-၁ | အရွယ်အစား-၂ | အရွယ်အစား-၃ |
| ၂ × PCR Premix (ဆိုးဆေးပါဝင်သည်) | ၅ မီလီလီတာ | ၁ မီလီလီတာ × ၁၅ | ၁ မီလီလီတာ × ၅၀ |
သိုလှောင်မှု
-၂၀°C မှာ ၂ နှစ်ကြာ သိမ်းဆည်းပါ။
ညွှန်ကြားချက်များ
၁။ တုံ့ပြန်မှုစနစ်
| အစိတ်အပိုင်းများ | အသံအတိုးအကျယ် |
| ၂ × PCR Premix (ဆိုးဆေးပါဝင်သည်) | ၂၅ မိုက်ခရိုလီတာ |
| ရှေ့သို့ ပရိုင်းမာ (၁၀ μM) | ၂ မိုက်ခရိုလီတာ |
| ပြောင်းပြန်ပရိုင်းမာ (၁၀ မိုက်ခရိုမီတာ) | ၂ မိုက်ခရိုလီတာ |
| DNA ပုံစံ* | ပြောင်းလဲနိုင်သော |
| ddH၂THE | ၅၀ µL အထိ |
* နမူနာပုံစံအသုံးပြုမှု- 50-200 ng genomic DNA၊ 0.1-10 ng plasmid DNA
၂။ တုံ့ပြန်မှုအစီအစဉ်
| ခြေလှမ်း | အပူချိန် | အချိန် | စက်ဘီးများ |
| ကနဦး ပျက်စီးခြင်း | ၉၄ ဒီဂရီစင်တီဂရိတ် | ၅ မိနစ် | ၁ |
| ပျက်စီးခြင်း | ၉၄ ဒီဂရီစင်တီဂရိတ် | ၃၀ စက္ကန့် | ၃၅ |
| အပူပေးခြင်း | ၅၀-၆၀ ဒီဂရီစင်တီဂရိတ် | ၃၀ စက္ကန့် | |
| တိုးချဲ့မှု | ၇၂ ဒီဂရီစင်တီဂရိတ် | ၃၀-၆၀ စက္ကန့်/ကီလိုဘိုက် | |
| နောက်ဆုံးတိုးချဲ့မှု | ၇၂ ဒီဂရီစင်တီဂရိတ် | ၁၀ မိနစ် | ၁ |
| ကိုင်ထားပါ | ၄ ဒီဂရီစင်တီဂရိတ် | - | ၁ |
၁။ မီလီဂရမ်၂+ ပါဝင်မှု- ဤထုတ်ကုန်တွင် MgCl 3 mM ပါဝင်သည်။၂PCR တုံ့ပြန်မှုအများစုအတွက် သင့်လျော်သည်။
၂။ အပူပေးအပူချိန်- ပရိုင်းမာများ၏ သီအိုရီ Tm တန်ဖိုးကို ကြည့်ပါ။ အပူပေးအပူချိန်ကို ပရိုင်းမာ၏ သီအိုရီတန်ဖိုးထက် ၂-၅ ဒီဂရီစင်တီဂရိတ် လျော့နည်းစွာ သတ်မှတ်နိုင်သည်။
၃။ တိုးချဲ့ချိန်- မော်လီကျူး ခွဲခြားသတ်မှတ်ရန်အတွက် ၃၀ စက္ကန့်/ကီလိုဘိုက် အကြံပြုထားသည်။ မျိုးဗီဇ ကလෝနင်းအတွက် ၆၀ စက္ကန့်/ကီလိုဘိုက် အကြံပြုထားသည်။
မှတ်စုများ
၁။ 2× PCR Master Mix ပါသည့် PCR ထုတ်ကုန်များသည် polyacrylamide gel electrophoresis အတွက် မသင့်တော်ပါ။
၂။ သင့်ဘေးကင်းရေးနှင့် ကျန်းမာရေးအတွက် ခွဲစိတ်မှုတွင် ဓာတ်ခွဲခန်းဝတ်စုံများနှင့် တစ်ခါသုံးလက်အိတ်များ ဝတ်ဆင်ပါ။
၃။ ၎င်းကို သုတေသနအသုံးပြုရန်အတွက်သာ အသုံးပြုပါသည်။