Magnetische universele virale DNA/RNA-kit HYD521
De Magnetic Universal Viral DNA/RNA Kit is geschikt voor het extraheren van viraal nucleïnezuur uit volbloed of celvrije lichaamsvloeistoffen (zoals serum, plasma, hersenvocht, neus-/keeluitstrijkjes, alveolaire spoelvloeistof, enz.). Deze methode maakt gebruik van magnetische kralenzuiveringstechnologie en vereist geen giftige fenol-chloroformextractie tijdens het extractieproces. Het is veilig, niet-toxisch en snel. Het verkregen product kan direct worden gebruikt in PCR, qPCR, tweedegeneratiesequencing en andere experimenten. In combinatie met geautomatiseerde magnetische kralenextractie-instrumenten kan een hoge doorvoer van nucleïnezuren worden bereikt.
Productinformatie
| Onderdelen | 48T |
| Lys- en bindingsoplossing | 33 ml |
| Magnetische kralenophanging | 1,1 ml |
| Wasbuffer A | 40 ml |
| Wasbuffer B | 80 ml |
| Elutieoplossing | 10 ml |
| Proteinase K | 1,1 ml |
Opslagomstandigheden
Proteinase K moet bewaard worden bij 2-8℃ en de overige ingrediënten op kamertemperatuur. De houdbaarheid is 18 maanden.
Voorbeeldbeschrijving
1. Toepasselijke monstertypen: volbloed, serum, plasma, hersenvocht, neus-/keeluitstrijkjes, alveolaire spoelvloeistof en andere monsters.
2. Opslag en transport van monsters: Monsters kunnen direct voor testen worden gebruikt of voor testen worden bewaard bij -70℃ of lager. De bewaartermijn is 6 maanden. Herhaaldelijk invriezen en ontdooien moet worden vermeden. Monsters worden via een gekoelde transportketen vervoerd.
3. Vereisten voor invriezen en ontdooien: Snel invriezen en ontdooien, vermijd herhaaldelijk invriezen en ontdooien.
Operatie
Controleer vóór het experiment of er neerslag in de oplossing zit en of de magnetische kralen opnieuw in suspensie kunnen worden gebracht.
1. Breng 200-300 μL monster over in een centrifugebuisje van 1,5 mL, voeg achtereenvolgens 600 μL lysis- en bindingsoplossing, 20 μL proteinase K en 20 μL magnetische kraalsuspensie toe en vortex gedurende 30 seconden op hoge snelheid. Incubeer gedurende 5-7 minuten bij 50℃. Als de thermostaat geen oscillatiefunctie heeft, vortex dan tijdens de incubatieperiode 3 keer, telkens gedurende 15 seconden.
2. Breng de oplossing over naar een magneetbuisje van 1,5 ml voor magnetische scheiding totdat de oplossing helder en transparant is, en gooi de oplossing vervolgens weg.
3. Voeg 700 μL wasbuffer A toe, vortex gedurende 10 seconden om de magnetische kralen te breken en breng het mengsel vervolgens over naar een magneetstandaard voor magnetische scheiding totdat de oplossing helder is. Gooi de oplossing daarna weg.
4. Voeg 700 μL wasbuffer B toe, vortex gedurende 10 seconden om de magnetische kralen te breken, breng over naar een magneetstandaard voor magnetische scheiding totdat de oplossing helder is en gooi de oplossing weg.
5. Voeg opnieuw 700 μL wasbuffer B toe, vortex gedurende 10 seconden om de magnetische kralen te breken, breng over naar een magneetstandaard voor magnetische scheiding totdat de oplossing helder is en gooi de oplossing weg.
6. Centrifugeer kort om de druppels op de buiswand te verzamelen, plaats de buis op een magneetstandaard voor klaring en absorbeer de resterende vloeistof. Laat 3-5 minuten aan de lucht drogen.
Let op: Ethanolresten remmen latere enzymreacties, zorg er daarom voor dat de ethanol volledig verdampt tijdens het drogen. Droog niet te lang om te voorkomen dat het daaropvolgende elutie-effect wordt beïnvloed.
7. Voeg 40-100 μL elutieoplossing toe en vortex gedurende 2-3 minuten op hoge snelheid om de magnetische kralen te breken. Incubeer gedurende 5 minuten bij 60℃ en vortex vervolgens gedurende 60 seconden op hoge snelheid.
8. Centrifugeer de vloeistof direct om deze uit de dop van het buisje te verzamelen en over te brengen naar een magnetisch rek totdat de magnetische kralen volledig zijn geadsorbeerd. Breng de vloeistof vervolgens voorzichtig over naar een nieuw centrifugebuisje om de nucleïnezuuroplossing te verkrijgen.
9. De nucleïnezuuroplossing kan bij -20 °C voor kortstondige opslag en bij -80 °C voor langdurige opslag worden bewaard.
Notities
1. De verschillende buffers in deze kit bevatten guanidinezouten. Draag voor uw eigen veiligheid en gezondheid een laboratoriumjas en wegwerphandschoenen. Hanteer de buffer volgens de geldende veiligheidsvoorschriften. Vermijd contact van de buffer met de huid, ogen en slijmvliezen. Mocht dit toch gebeuren, spoel dan onmiddellijk met veel water en raadpleeg een arts.
2. Als er neerslag in de oplossing ontstaat, moet deze voor gebruik in water van 30℃ worden geweekt totdat de neerslag volledig is opgelost.
3. Als de magnetische kralensuspensie bevroren is, gebruik deze dan niet.
4. De verschillende buffers in deze set bevatten guanidinezouten. Gebruik hiervoor geen oxiderende ontsmettingsmiddelen zoals natriumhypochloriet, anders komen er giftige gassen vrij en moeten ze als medisch afval worden behandeld.
5. Er kunnen tijdens de elutie restanten van magnetische kralen achterblijven. Probeer te voorkomen dat u magnetische kralen inademt bij het opzuigen van monsters.