Magnetisk universelt viralt DNA/RNA-sett HYD521
Magnetisk universelt viralt DNA/RNA-sett er egnet for utvinning av viral nukleinsyre fra helblod eller cellefrie kroppsvæsker (som serum, plasma, cerebrospinalvæske, nese-/svelgprøver, alveolær skyllevæske osv.). Denne metoden bruker magnetisk kule-rensingsteknologi, og det kreves ingen giftig fenolkloroform-utvinning under utvinningsprosessen. Den er trygg, giftfri og rask. Det oppnådde produktet kan brukes direkte i PCR, qPCR, andregenerasjonssekvensering og andre eksperimenter. Når det brukes med automatiserte utvinningsinstrumenter med magnetiske kuler, kan man oppnå høy gjennomstrømning av utvinning av nukleinsyrer.
Produktinformasjon
| Komponenter | 48T |
| Lyse- og bindingsløsning | 33 ml |
| Magnetisk perleoppheng | 1,1 ml |
| Vaskebuffer A | 40 ml |
| Vaskebuffer B | 80 ml |
| Elueringsløsning | 10 ml |
| Proteinase K | 1,1 ml |
Oppbevaringsforhold
Proteinase K bør oppbevares ved 2–8 ℃, og de andre ingrediensene bør oppbevares ved romtemperatur. Holdbarheten er 18 måneder.
Eksempelbeskrivelse
1. Gjeldende prøvetyper: fullblod, serum, plasma, cerebrospinalvæske, nese-/svelgprøver, alveolær skyllevæske og andre prøver.
2. Oppbevaring og transport av prøver: Prøver kan brukes til testing umiddelbart eller lagres ved -70 ℃ eller lavere for testing. Lagringsperioden er 6 måneder. Gjentatt frysing og tining bør unngås. Prøver transporteres via kjølekjede.
3. Krav til frysing og tining: Rask frysing og tining, unngå gjentatt frysing og tining.
Operasjon
Før eksperimentet, sjekk om løsningen har utfelling og om de magnetiske kulene kan resuspenderes.
1. Overfør 200–300 μL prøve til et 1,5 ml sentrifugerør, tilsett 600 μL lyse- og bindingsløsning, 20 μL proteinase K og 20 μL magnetisk kulesuspensjon i rekkefølge, og virvles ved høy hastighet i 30 sekunder. Inkuber ved 50 ℃ i 5–7 minutter. Hvis termostaten ikke har en oscillasjonsfunksjon, virvles 3 ganger i løpet av inkubasjonsperioden, hver gang i 15 sekunder.
2. Overfør til et 1,5 ml magnetisk stativ for magnetisk separasjon til løsningen er klar og gjennomsiktig, og kast løsningen.
3. Tilsett 700 μL vaskebuffer A, virvles i 10 sekunder for å bryte opp de magnetiske kulene, og overfør deretter til et magnetisk stativ for magnetisk separasjon til løsningen er klar, og kast løsningen.
4. Tilsett 700 μL vaskebuffer B, vortex i 10 sekunder for å bryte opp de magnetiske kulene, overfør til et magnetisk stativ for magnetisk separasjon til løsningen er klar, og kast løsningen.
5. Tilsett 700 μL vaskebuffer B igjen, vortex i 10 sekunder for å bryte opp de magnetiske kulene, overfør til et magnetisk stativ for magnetisk separasjon til løsningen er klar, og kast løsningen.
6. Sentrifuger kort for å samle dråper på rørveggen, overfør til et magnetisk stativ for klargjøring og absorber den gjenværende væsken. Lufttørk i 3–5 minutter.
Merk: Etanolrester vil hemme påfølgende enzymreaksjoner, så sørg for at etanolen fordamper helt under tørking. Ikke tørk for lenge for å unngå å påvirke den påfølgende elueringseffekten.
7. Tilsett 40–100 μL elueringsløsning, virvles ved høy hastighet i 2–3 minutter for å løsne de magnetiske kulene. Inkuber ved 60 ℃ i 5 minutter, og virvles deretter ved høy hastighet i 60 sekunder.
8. Sentrifuger umiddelbart for å samle opp væsken fra rørkorken og overfør den til magnetstativet til de magnetiske kulene er fullstendig adsorbert. Overfør deretter væsken forsiktig til et nytt sentrifugerør for å få nukleinsyreløsningen.
9. Nukleinsyreløsningen kan lagres ved -20 °C for korttidslagring og -80 °C for langtidslagring.
Notater
1. De forskjellige bufferne i dette settet inneholder guanidinsalter. For din sikkerhet og helse, bruk laboratoriefrakk og engangshansker. Håndter i henhold til sikkerhetsstandarder. Ikke la bufferen komme i kontakt med hud, øyne og slimhinner. Hvis det skjer, skyll straks med rikelig med vann og kontakt lege.
2. Hvis løsningen utfeller seg, må den legges i vann ved 30 ℃ til bunnfallet er helt oppløst før bruk.
3. Ikke bruk den magnetiske kulesuspensjonen hvis den er frossen.
4. De forskjellige bufferne i dette settet inneholder guanidinsalter. Ikke bruk oksiderende desinfeksjonsmidler som natriumhypokloritt til å behandle dem, ellers vil det frigjøres giftige gasser, og de må behandles som medisinsk avfall.
5. Det kan være gjenværende magnetiske kuler under eluering. Prøv å unngå å inhalere magnetiske kuler når du aspirerer prøver.