2× premix PCR (z barwnikiem) HYA442
Mieszanina Master Mix 2× PCR zawiera polimerazę DNA Taq, dNTP i inne składniki niezbędne do PCR. Mieszanina Master Mix jest stabilna przez 3 miesiące w temperaturze 4°C dzięki naszym specjalnie dobranym stabilizatorom. Roztwór pre-mix jest zoptymalizowany pod kątem konwencjonalnej reakcji PCR i gotowy do użycia po dodaniu matrycy DNA i starterów. Produkty PCR można bezpośrednio załadować do elektroforezy z wstępnie załadowanym błękitem bromofenolowym. Amplifikowane produkty zawierają wypustki 3'-dA i można je łatwo klonować do wektora T. Mieszanina Master Mix 2× PCR upraszcza procedurę PCR i ogranicza zanieczyszczenie.
Komponenty
| Komponenty | Rozmiar 1 | Rozmiar-2 | Rozmiar 3 |
| 2× premix PCR (z barwnikiem) | 5 ml | 1 ml×15 | 1 ml×50 |
Składowanie
Przechowywać w temperaturze -20°C przez 2 lata.
Instrukcje
1. System reakcji
| Komponenty | Tom |
| 2× premix PCR (z barwnikiem) | 25 ul |
| Starter do przodu (10 μM) | 2 µl |
| Starter odwrotny (10 μM) | 2 µl |
| Szablon DNA* | Zmienny |
| ddH2THE | Do 50 µL |
*Wykorzystanie szablonu: 50–200 ng genomowego DNA; 0,1-10 ng plazmidowego DNA
2. Program reakcji
| Krok | Temperatura | Czas | Cykle |
| Początkowa denaturacja | 94 ℃ | 5 minut | 1 |
| Denaturacja | 94 ℃ | 30 sekund | 35 |
| Wyżarzanie | 50-60 ℃ | 30 sekund | |
| Rozszerzenie | 72 ℃ | 30-60 sek./kb | |
| Ostateczne przedłużenie | 72 ℃ | 10 minut | 1 |
| Trzymać | 4 ℃ | - | 1 |
1. Mg2+ stężenie: Ten produkt zawiera 3 mM MgCl2, odpowiedni do większości reakcji PCR.
2. Temperatura wyżarzania: Proszę zapoznać się z teoretyczną wartością Tm starterów. Temperaturę wyżarzania można ustawić na wartość o 2-5°C niższą od teoretycznej wartości startera.
3. Czas wydłużenia: Do identyfikacji molekularnej zaleca się 30 s/kb. Do klonowania genów zaleca się 60 s/kb.
Notatki
1. Produkty PCR z 2× PCR Master Mix nie nadają się do elektroforezy w żelu poliakrylamidowym.
2. Ze względów bezpieczeństwa i zdrowia prosimy o noszenie fartuchów laboratoryjnych i rękawiczek jednorazowych podczas zabiegów.
3. Używać TYLKO do celów badawczych!