Uniwersalny magnetyczny zestaw DNA/RNA wirusowy HYD521
Uniwersalny zestaw Magnetic Universal Viral DNA/RNA nadaje się do ekstrakcji wirusowego kwasu nukleinowego z krwi pełnej lub bezkomórkowych płynów ustrojowych (takich jak surowica, osocze, płyn mózgowo-rdzeniowy, wymazy z nosa/gardła, płyn z płukania pęcherzykowego itp.). Metoda ta wykorzystuje technologię oczyszczania z wykorzystaniem kulek magnetycznych i nie wymaga toksycznej ekstrakcji fenolem i chloroformem. Jest bezpieczna, nietoksyczna i szybka. Uzyskany produkt może być bezpośrednio stosowany w reakcjach PCR, qPCR, sekwencjonowaniu drugiej generacji i innych eksperymentach. W połączeniu z automatycznymi urządzeniami do ekstrakcji z kulkami magnetycznymi możliwe jest uzyskanie wysokiej wydajności ekstrakcji kwasów nukleinowych.
Informacje o produkcie
| Komponenty | 48T |
| Roztwór do lizy i wiązania | 33 ml |
| Zawieszenie koralików magnetycznych | 1,1 ml |
| Bufor do mycia A | 40 ml |
| Bufor do mycia B | 80 ml |
| Roztwór elucyjny | 10 ml |
| Proteinaza K | 1,1 ml |
Warunki przechowywania
Proteinazę K należy przechowywać w temperaturze 2–8°C, a pozostałe składniki w temperaturze pokojowej. Okres przydatności do użycia wynosi 18 miesięcy.
Przykładowy opis
1. Rodzaje próbek, które można stosować: krew pełna, surowica, osocze, płyn mózgowo-rdzeniowy, wymazy z nosa/gardła, płyn z płukania pęcherzykowego i inne próbki.
2. Przechowywanie i transport próbek: Próbki można natychmiast wykorzystać do badań lub przechowywać w temperaturze -70°C lub niższej. Okres przechowywania wynosi 6 miesięcy. Należy unikać wielokrotnego zamrażania i rozmrażania. Próbki są transportowane w chłodni.
3. Wymagania dotyczące zamrażania i rozmrażania: szybkie zamrażanie i rozmrażanie, unikanie wielokrotnego zamrażania i rozmrażania.
Działanie
Przed przeprowadzeniem eksperymentu należy sprawdzić, czy w roztworze wytrącił się osad i czy kulki magnetyczne można ponownie zawiesić.
1. Przenieść 200–300 μl próbki do probówki wirówkowej o pojemności 1,5 ml, dodać kolejno 600 μl roztworu lizy i wiążącego, 20 μl proteinazy K i 20 μl zawiesiny kulek magnetycznych, a następnie wirować z dużą prędkością przez 30 sekund. Inkubować w temperaturze 50°C przez 5–7 minut. Jeśli termostat nie posiada funkcji oscylacji, wirować 3 razy w trakcie inkubacji, za każdym razem przez 15 sekund.
2. Przenieść do pojemnika magnetycznego o pojemności 1,5 ml i poddać go rozdziałowi magnetycznemu, aż roztwór stanie się klarowny i przejrzysty, a następnie wyrzucić.
3. Dodać 700 μl buforu do płukania A, zamieszać przez 10 sekund, aby rozbić kulki magnetyczne, a następnie przenieść do statywu magnetycznego w celu separacji magnetycznej, aż roztwór stanie się klarowny, a następnie wyrzucić roztwór.
4. Dodać 700 μl buforu płuczącego B, zawirować przez 10 s, aby rozbić kulki magnetyczne, przenieść do statywu magnetycznego w celu separacji magnetycznej, aż roztwór stanie się klarowny, a następnie wyrzucić roztwór.
5. Ponownie dodać 700 μl buforu płuczącego B, zawirować przez 10 s, aby rozbić kulki magnetyczne, przenieść do statywu magnetycznego w celu separacji magnetycznej, aż roztwór stanie się klarowny, a następnie wyrzucić roztwór.
6. Krótko odwirować, aby zebrać krople na ściankach probówki, przenieść na statyw magnetyczny w celu klarowania i wchłonąć pozostałą ciecz. Suszyć na powietrzu przez 3-5 minut.
Uwaga: Pozostałości etanolu hamują późniejsze reakcje enzymatyczne, dlatego należy upewnić się, że etanol całkowicie odparuje podczas suszenia. Nie należy suszyć zbyt długo, aby uniknąć wpływu na efekt elucji.
7. Dodać 40–100 μl roztworu elucyjnego i wirować na wysokich obrotach przez 2–3 minuty, aby rozbić kulki magnetyczne. Inkubować w temperaturze 60°C przez 5 minut, a następnie wirować na wysokich obrotach przez 60 sekund.
8. Natychmiastowe wirowanie w celu zebrania płynu z korka probówki i przeniesienie go do statywu magnetycznego, aż kulki magnetyczne zostaną całkowicie zaadsorbowane. Następnie ostrożnie przenieś płyn do nowej probówki wirówkowej, aby uzyskać roztwór kwasu nukleinowego.
9. Roztwór kwasu nukleinowego można przechowywać w temperaturze -20°C w przypadku krótkotrwałego przechowywania i w temperaturze -80°C w przypadku długotrwałego przechowywania.
Notatki
1. Różne bufory w tym zestawie zawierają sole guanidyny. Dla własnego bezpieczeństwa i zdrowia, prosimy o noszenie fartucha laboratoryjnego i rękawiczek jednorazowych. Należy obchodzić się z nimi zgodnie ze standardami bezpieczeństwa. Nie dopuścić do kontaktu buforu ze skórą, oczami ani błonami śluzowymi. W przypadku kontaktu natychmiast przemyć dużą ilością wody i zasięgnąć porady lekarza.
2. Jeśli roztwór wytrąci się, przed użyciem należy go zanurzyć w wodzie o temperaturze 30°C, aż do całkowitego rozpuszczenia osadu.
3. Jeśli zawiesina kulek magnetycznych jest zamarznięta, nie należy jej używać.
4. Różne bufory w tym zestawie zawierają sole guanidyny. Nie należy stosować do ich dezynfekcji środków utleniających, takich jak podchloryn sodu, ponieważ w przeciwnym razie uwolnią się toksyczne gazy i należy je traktować jak odpady medyczne.
5. Podczas elucji mogą pozostać resztki kulek magnetycznych. Unikaj wdychania kulek magnetycznych podczas aspiracji próbek.