۲× PCR پریمکس (د رنګ سره) HYA442
۲× PCR ماسټر مکس د Taq DNA پولیمیریز، dNTPs، او نور PCR اړین اجزا لري. ماسټر مکس زموږ د دودیز سټیبلائزرونو سره په ۴℃ کې د ۳ میاشتو لپاره مستحکم دی. د پری مکس محلول د دودیز PCR لپاره غوره شوی او د DNA ټیمپلیټ او پرائمرونو اضافه کولو سره کارولو ته چمتو دی. د PCR محصولات د مخکې بار شوي بروموفینول نیلي رنګ سره د الیکٹروفوریسس لپاره مستقیم بار کیدی شي. امپلیف شوي محصولات د 3 '-dA پروټروژن لري او په اسانۍ سره په T ویکتور کې کلون کیدی شي. د ۲× PCR ماسټر مکس د PCR پروسیجر ساده کوي او ککړتیا کموي.
اجزا
| اجزا | اندازه-۱ | اندازه-۲ | اندازه-۳ |
| ۲× د PCR پریمکس (د رنګ سره) | ۵ ملی لیتره | ۱ ملی لیتر × ۱۵ | ۱ ملی لیتر × ۵۰ |
ذخیره کول
د دوو کلونو لپاره په -20 درجو سانتي ګراد کې وساتئ.
لارښوونې
۱. د غبرګون سیسټم
| اجزا | حجم |
| ۲× د PCR پریمکس (د رنګ سره) | ۲۵ یو لیتره |
| مخکینۍ پرائمر (۱۰ μM) | ۲ μl |
| ریورس پرائمر (۱۰ μM) | ۲ μl |
| د ډي این اې کينډۍ* | متغیر |
| د ddH۲د | تر ۵۰ µL پورې |
*کینډۍ کارول: 50-200 ng جینومیک DNA؛ 0.1-10 ng پلاسمیډ DNA
۲. د غبرګون پروګرام
| ګام | د حرارت درجه | وخت | سائیکلونه |
| لومړنی تخفیف | ۹۴ ℃ | ۵ دقیقې | ۱ |
| د انحراف (denaturation) | ۹۴ ℃ | ۳۰ ثانیې | ۳۵ |
| انیلینګ | ۵۰-۶۰ ℃ | ۳۰ ثانیې | |
| غځول | ۷۲ ℃ | ۳۰-۶۰ ثانیې/کیلو بایټ | |
| وروستۍ غځول | ۷۲ ℃ | ۱۰ دقیقې | ۱ |
| ونیسئ | ۴ ℃ | - | ۱ |
۱. ملی ګرامه۲+ غلظت: دا محصول 3 ملي میتر MgCl لري۲، د ډیری PCR تعاملاتو لپاره مناسب.
۲. د انیل کولو تودوخه: مهرباني وکړئ د پرائمرونو تیوریکي Tm ارزښت ته مراجعه وکړئ. د انیل کولو تودوخه د پرائمر د تیوریکي ارزښت څخه ۲-۵ ℃ ټیټ ته ټاکل کیدی شي.
۳. د غځولو وخت: د مالیکولي پیژندنې لپاره، ۳۰ ثانیې/kb سپارښتنه کیږي. د جین کلونینګ لپاره، ۶۰ ثانیې/kb سپارښتنه کیږي.
یادښتونه
۱. د ۲× PCR ماسټر مکس سره د PCR محصولات د پولی اکریلامایډ جیل الیکٹروفورسیس لپاره مناسب ندي.
۲. ستاسو د خوندیتوب او روغتیا لپاره، مهرباني وکړئ د عملیاتو لپاره د لابراتوار کوټونه او یو ځل مصرف کیدونکي دستکشې واغوندئ.
۳. دا یوازې د څیړنې لپاره کارول کیږي!