2× Premix PCR (cu colorant) HYA442
Master Mix 2× PCR conține Taq ADN polimerază, dNTP-uri și alte componente necesare PCR. Master Mix-ul este stabil timp de 3 luni la 4℃ cu stabilizatorii noștri personalizați. Soluția de pre-amestecare este optimizată pentru PCR convențional și gata de utilizare prin adăugarea șablonului ADN și a primerilor. Produsele PCR pot fi încărcate direct pentru electroforeză cu colorant albastru de bromofenol preîncărcat. Produsele amplificate conțin proeminență 3'-dA și pot fi clonate cu ușurință în vectorul T. Master Mix 2× PCR simplifică procedura PCR și reduce contaminarea.
Componente
| Componente | Mărimea 1 | Mărimea 2 | Mărimea 3 |
| 2× Premix PCR (cu colorant) | 5 ml | 1 mL × 15 | 1 mL × 50 |
Depozitare
A se păstra la -20°C timp de 2 ani.
Instrucţiuni
1. Sistem de reacție
| Componente | Volum |
| 2× Premix PCR (cu colorant) | 25 µL |
| Primer direct (10 μM) | 2 µL |
| Primer invers (10 μM) | 2 µL |
| Șablon ADN* | Variabilă |
| ddH2THE | Până la 50 µL |
*Utilizare șablon: 50-200 ng ADN genomic; 0,1-10 ng ADN plasmid
2. Program de reacție
| Pas | Temperatură | Timp | Cicluri |
| Denaturarea inițială | 94 ℃ | 5 minute | 1 |
| Denaturare | 94 ℃ | 30 de secunde | 35 de ani |
| Recoacere | 50-60 ℃ | 30 de secunde | |
| Extensie | 72 ℃ | 30-60 sec/kb | |
| Extensie finală | 72 ℃ | 10 minute | 1 |
| Așteptați | 4 ℃ | - | 1 |
1. Mg2+ concentrație: Acest produs conține 3 mM de MgCl2, potrivit pentru majoritatea reacțiilor PCR.
2. Temperatura de recoacere: Vă rugăm să consultați valoarea teoretică Tm a primerilor. Temperatura de recoacere poate fi setată cu 2-5℃ mai mică decât valoarea teoretică a primerului.
3. Timp de prelungire: Pentru identificarea moleculară, se recomandă 30 sec/kb. Pentru clonarea genelor, se recomandă 60 sec/kb.
Note
1. Produsele PCR cu 2× PCR Master Mix nu sunt potrivite pentru electroforeza pe gel de poliacrilamidă.
2. Pentru siguranța și sănătatea dumneavoastră, vă rugăm să purtați halate de laborator și mănuși de unică folosință în timpul operației.
3. Este utilizat DOAR în scopuri de cercetare!