Kit ADN/ARN viral universal magnetic HYD521
Kitul Magnetic Universal Viral ADN/ARN este potrivit pentru extragerea acidului nucleic viral din sânge integral sau fluide corporale acelulare (cum ar fi ser, plasmă, lichid cefalorahidian, tampoane nazal/faringiene, lichid de lavaj alveolar etc.). Această metodă utilizează tehnologia de purificare cu sfere magnetice și nu este necesară extracția cu cloroform fenolic toxic în timpul procesului de extracție. Este sigură, netoxică și rapidă. Produsul obținut poate fi utilizat direct în PCR, qPCR, secvențiere de a doua generație și alte experimente. Atunci când este utilizat cu instrumente automate de extracție cu sfere magnetice, se poate obține extracția de mare randament a acizilor nucleici.
Informații despre produs
| Componente | 48T |
| Soluție de liză și legare | 33 ml |
| Suspensie magnetică cu bile | 1,1 ml |
| Tampon de spălare A | 40 ml |
| Tampon de spălare B | 80 ml |
| Soluție de eluție | 10 ml |
| Proteinaza K | 1,1 ml |
Condiții de depozitare
Proteinaza K trebuie păstrată la 2~8℃, iar celelalte ingrediente trebuie păstrate la temperatura camerei. Termenul de valabilitate este de 18 luni.
Descrierea eșantionului
1. Tipuri de probe aplicabile: sânge integral, ser, plasmă, lichid cefalorahidian, tampoane nazale/faringiene, lichid de lavaj alveolar și alte probe.
2. Depozitarea și transportul probelor: Probele pot fi utilizate imediat pentru testare sau depozitate la -70℃ sau mai puțin. Perioada de depozitare este de 6 luni. Trebuie evitată congelarea și decongelarea repetată. Probele sunt transportate prin lanț frigorific.
3. Cerințe privind înghețul-dezghețul: Congelare și dezghețare rapidă, evitați congelarea și dezghețarea repetată.
Operațiune
Înainte de experiment, verificați dacă soluția a precipitat și dacă perlele magnetice pot fi resuspendate.
1. Transferați 200~300 μL de probă într-un tub de centrifugă de 1,5 mL, adăugați secvențial 600 μL de soluție de liză și legare, 20 μL de proteinază K și 20 μL de suspensie de sfere magnetice și vortexați la viteză mare timp de 30 de secunde. Incubați la 50℃ timp de 5~7 minute. Dacă termostatul nu are funcție de oscilație, vortexați de 3 ori în timpul perioadei de incubare, de fiecare dată timp de 15 secunde.
2. Transferați pe un suport magnetic de 1,5 ml pentru separare magnetică până când soluția devine limpede și transparentă și aruncați soluția.
3. Adăugați 700 μL de soluție tampon de spălare A, vortexați timp de 10 secunde pentru a desface perlele magnetice, apoi transferați pe un suport magnetic pentru separare magnetică până când soluția devine limpede și aruncați soluția.
4. Adăugați 700 μL de tampon de spălare B, vortexați timp de 10 secunde pentru a desface perlele magnetice, transferați pe un suport magnetic pentru separare magnetică până când soluția devine limpede și aruncați soluția.
5. Adăugați din nou 700 μL de soluție tampon de spălare B, vortexați timp de 10 secunde pentru a desface perlele magnetice, transferați pe un suport magnetic pentru separare magnetică până când soluția devine limpede și aruncați soluția.
6. Centrifugați scurt pentru a colecta picăturile de pe peretele tubului, transferați-le pe un suport magnetic pentru clarificare și absorbiți lichidul rezidual. Uscați la aer timp de 3-5 minute.
Notă: Reziduurile de etanol vor inhiba reacțiile enzimatice ulterioare, așadar asigurați-vă că etanolul se evaporă complet la uscare. Nu uscați prea mult timp pentru a evita afectarea efectului de eluție ulterior.
7. Adăugați 40~100 μL de soluție de eluție, vortexați la viteză mare timp de 2~3 minute pentru a desface perlele magnetice. Incubați la 60℃ timp de 5 minute, apoi vortexați la viteză mare timp de 60 de secunde.
8. Centrifugați instantaneu pentru a colecta lichidul din capacul tubului și a-l transfera pe suportul magnetic până când perlele magnetice sunt complet adsorbite. Apoi, transferați cu grijă lichidul într-un nou tub de centrifugare pentru a obține soluția de acid nucleic.
9. Soluția de acid nucleic poate fi păstrată la -20°C pentru depozitare pe termen scurt și la -80°C pentru depozitare pe termen lung.
Note
1. Diversele soluții tampon din acest kit conțin săruri de guanidină. Pentru siguranța și sănătatea dumneavoastră, vă rugăm să purtați un halat de laborator și mănuși de unică folosință. Și manipulați conform precauțiilor standard de siguranță. Nu lăsați soluția tampon să intre în contact cu pielea, ochii și membranele mucoase. Dacă se întâmplă acest lucru, spălați imediat cu multă apă și solicitați asistență medicală.
2. Dacă soluția precipită, aceasta trebuie spălată în apă la 30 ℃ până când precipitatul este complet dizolvat înainte de utilizare.
3. Dacă suspensia de sfere magnetice este înghețată, nu o utilizați.
4. Diversele soluții tampon din acest kit conțin săruri de guanidină. Nu utilizați dezinfectanți oxidanți, cum ar fi hipocloritul de sodiu, pentru a le trata, altfel se vor elibera gaze toxice și acestea trebuie tratate ca deșeuri medicale.
5. Pot exista perle magnetice reziduale în timpul eluției. Încercați să evitați inhalarea perlelor magnetice atunci când aspirați probe.