2× ПЦР-премикс (с красителем) HYA442
2× ПЦР Мастер-микс содержит ДНК-полимеразу Taq, dNTP и другие компоненты, необходимые для ПЦР. Мастер-микс стабилен в течение 3 месяцев при 4℃ благодаря нашим специально разработанным стабилизаторам. Раствор для премикса оптимизирован для обычной ПЦР и готов к использованию после добавления ДНК-шаблона и праймеров. Продукты ПЦР можно непосредственно загружать для электрофореза с предварительно загруженным красителем бромфеноловым синим. Амплифицированные продукты содержат 3'-dA-выступ и легко клонируются в Т-вектор. 2× ПЦР Мастер-микс упрощает процедуру ПЦР и снижает уровень загрязнения.
Компоненты
| Компоненты | Размер-1 | Размер-2 | Размер-3 |
| 2× ПЦР-премикс (с красителем) | 5 мл | 1 мл×15 | 1 мл×50 |
Хранилище
Хранить при температуре -20°C в течение 2 лет.
Инструкции
1. Реакционная система
| Компоненты | Объем |
| 2× ПЦР-премикс (с красителем) | 25 мкл |
| Прямой праймер (10 мкМ) | 2 мкл |
| Обратный праймер (10 мкМ) | 2 мкл |
| ДНК-шаблон* | Переменная |
| ddH2ТЕ | До 50 мкл |
*Использование шаблона: 50–200 нг геномной ДНК; 0,1-10 нг плазмидной ДНК
2. Программа реакции
| Шаг | Температура | Время | Циклы |
| Начальная денатурация | 94 ℃ | 5 мин | 1 |
| Денатурация | 94 ℃ | 30 с | 35 |
| Отжиг | 50-60 ℃ | 30 с | |
| Расширение | 72 ℃ | 30-60 сек/кб | |
| Последнее продление | 72 ℃ | 10 мин | 1 |
| Держать | 4 ℃ | - | 1 |
1. Мг2+ Концентрация: Данный продукт содержит 3 мМ MgCl₂.2Подходит для большинства ПЦР-реакций.
2. Температура отжига: Пожалуйста, ориентируйтесь на теоретическое значение Tm для грунтовки. Температуру отжига можно установить на 2-5℃ ниже теоретического значения для грунтовки.
3. Время удлинения: для молекулярной идентификации рекомендуется 30 сек/кб. Для клонирования генов рекомендуется 60 сек/кб.
Примечания
1. Продукты ПЦР, полученные с использованием 2× PCR Master Mix, не подходят для электрофореза в полиакриламидном геле.
2. В целях вашей безопасности и охраны здоровья, пожалуйста, надевайте лабораторные халаты и одноразовые перчатки во время работы.
3. Используется ТОЛЬКО в исследовательских целях!