Универсальный магнитный набор для анализа вирусной ДНК/РНК HYD521
Универсальный магнитный набор для выделения вирусной ДНК/РНК подходит для экстракции вирусной нуклеиновой кислоты из цельной крови или бесклеточных биологических жидкостей (таких как сыворотка, плазма, спинномозговая жидкость, мазки из носа/глотки, жидкость альвеолярного лаважа и т. д.). Этот метод использует технологию очистки с помощью магнитных шариков, и в процессе экстракции не требуется токсичная экстракция фенолом и хлороформом. Он безопасен, нетоксичен и быстр. Полученный продукт может быть непосредственно использован в ПЦР, кПЦР, секвенировании второго поколения и других экспериментах. При использовании с автоматизированными приборами для экстракции с помощью магнитных шариков достигается высокопроизводительная экстракция нуклеиновых кислот.
Информация о продукте
| Компоненты | 48Т |
| Раствор для лизиса и связывания | 33 мл |
| Подвеска магнитных шариков | 1,1 мл |
| Буфер для промывки А | 40 мл |
| Буфер для промывки B | 80 мл |
| Элюционный раствор | 10 мл |
| Протеиназа К | 1,1 мл |
Условия хранения
Протеиназу К следует хранить при температуре 2–8℃, а остальные ингредиенты — при комнатной температуре. Срок годности — 18 месяцев.
Пример описания
1. Применимые типы образцов: цельная кровь, сыворотка, плазма, спинномозговая жидкость, мазки из носа/глотки, жидкость альвеолярного лаважа и другие образцы.
2. Хранение и транспортировка образцов: Образцы можно использовать для анализа немедленно или хранить при температуре -70℃ или ниже. Срок хранения составляет 6 месяцев. Следует избегать повторного замораживания и оттаивания. Транспортировка образцов осуществляется с соблюдением холодовой цепи.
3. Требования к заморозке и оттаиванию: быстрая заморозка и оттаивание, избегать повторных заморозок и оттаиваний.
Операция
Перед экспериментом проверьте, не образовался ли в растворе осадок и можно ли повторно суспендировать магнитные шарики.
1. Перенесите 200–300 мкл образца в центрифужную пробирку объемом 1,5 мл, добавьте последовательно 600 мкл раствора для лизиса и связывания, 20 мкл протеиназы К и 20 мкл суспензии магнитных шариков, и перемешивайте на высокой скорости в течение 30 секунд. Инкубируйте при 50℃ в течение 5–7 минут. Если термостат не имеет функции осцилляции, перемешивайте 3 раза в течение периода инкубации по 15 секунд каждый раз.
2. Перенесите раствор в магнитную стойку объемом 1,5 мл для магнитного разделения до тех пор, пока раствор не станет прозрачным, после чего удалите раствор.
3. Добавьте 700 мкл промывочного буфера А, перемешайте на вортексе в течение 10 секунд, чтобы разрушить магнитные шарики, затем перенесите на магнитную подставку для магнитного разделения до тех пор, пока раствор не станет прозрачным, после чего удалите раствор.
4. Добавьте 700 мкл промывочного буфера B, перемешайте на вортексе в течение 10 секунд для разрушения магнитных шариков, перенесите на магнитную подставку для магнитной сепарации до получения прозрачного раствора и слейте раствор.
5. Снова добавьте 700 мкл промывочного буфера B, перемешайте на вортексе в течение 10 секунд, чтобы разрушить магнитные шарики, перенесите на магнитную подставку для магнитной сепарации до тех пор, пока раствор не станет прозрачным, и выбросьте раствор.
6. Кратковременно центрифугируйте, чтобы собрать капли на стенках пробирки, перенесите на магнитную подставку для осветления и удалите остатки жидкости. Высушите на воздухе в течение 3-5 минут.
Примечание: Остатки этанола будут ингибировать последующие ферментативные реакции, поэтому убедитесь, что этанол полностью испарился при сушке. Не сушите слишком долго, чтобы избежать влияния на последующий эффект элюирования.
7. Добавьте 40–100 мкл элюирующего раствора, перемешивайте на высокой скорости в течение 2–3 минут для разрушения магнитных шариков. Инкубируйте при 60℃ в течение 5 минут, затем перемешивайте на высокой скорости в течение 60 секунд.
8. Немедленно центрифугируйте, чтобы собрать жидкость с крышки пробирки и перенести ее на магнитный штатив до полного прилипания магнитных шариков. Затем осторожно перелейте жидкость в новую центрифужную пробирку для получения раствора нуклеиновой кислоты.
9. Раствор нуклеиновой кислоты можно хранить при температуре -20 °C для кратковременного хранения и при температуре -80 °C для длительного хранения.
Примечания
1. Различные буферные растворы в этом наборе содержат соли гуанидина. В целях вашей безопасности и охраны здоровья, пожалуйста, надевайте лабораторный халат и одноразовые перчатки. Обращайтесь с раствором в соответствии со стандартными мерами предосторожности. Не допускайте попадания буферного раствора на кожу, в глаза и на слизистые оболочки. В случае попадания немедленно промойте большим количеством воды и обратитесь за медицинской помощью.
2. Если в растворе образуется осадок, перед использованием его необходимо промыть в воде температурой 30℃ до полного растворения осадка.
3. Если суспензия магнитных шариков замерзла, использовать ее нельзя.
4. Различные буферные растворы в этом наборе содержат соли гуанидина. Не используйте для их обработки окисляющие дезинфицирующие средства, такие как гипохлорит натрия, иначе будут выделяться токсичные газы, и их необходимо будет утилизировать как медицинские отходы.
5. В процессе элюирования могут оставаться магнитные шарики. Старайтесь избегать вдыхания магнитных шариков при отборе проб.