2× پي سي آر پريمڪس (ڊائي سان) HYA442
2× PCR ماسٽر مڪس ۾ Taq DNA Polymerase، dNTPs، ۽ ٻيا PCR-گهربل جزا شامل آهن. ماسٽر مڪس اسان جي ڪسٽمائيز اسٽيبلائيزر سان 4℃ تي 3 مهينن لاءِ مستحڪم آهي. پري-مڪس حل روايتي PCR لاءِ بهتر ڪيو ويو آهي ۽ DNA ٽيمپليٽ ۽ پرائمر شامل ڪندي استعمال لاءِ تيار آهي. PCR پراڊڪٽس کي سڌو سنئون اليڪٽرروفورسس لاءِ پري لوڊ ٿيل بروموفينول نيرو ڊائي سان لوڊ ڪري سگهجي ٿو. ايمپليفائيڊ پراڊڪٽس ۾ 3 '-dA پروٽروشن شامل آهن ۽ آساني سان T ویکٹر ۾ ڪلون ڪري سگهجن ٿا. 2× PCR ماسٽر مڪس PCR طريقيڪار کي آسان بڻائي ٿو ۽ آلودگي کي گھٽائي ٿو.
جزا
| جزا | سائيز-1 | سائيز-2 | سائيز-3 |
| 2× پي سي آر پريمڪس (ڊائي سان) | 5 ملي ليٽر | 1 ايم ايل × 15 | 1 ايم ايل × 50 |
اسٽوريج
-20 ° C تي 2 سالن تائين ذخيرو ڪريو.
هدايتون
1. رد عمل جو نظام
| جزا | جلد |
| 2× پي سي آر پريمڪس (ڊائي سان) | 25 يو ايل |
| فارورڊ پرائمر (10 μM) | 2 μl |
| ريورس پرائمر (10 μM) | 2 μl |
| ڊي اين اي ٽيمپليٽ* | متغير |
| ڊي ڊي ايڇ2جي | 50 μL تائين |
*سانچو استعمال: 50-200 اين جينومڪ ڊي اين اي؛ 0.1-10 اين جي پلازميڊ ڊي اين اي
2. رد عمل جو پروگرام
| قدم | گرمي پد | وقت | سائيڪلون |
| شروعاتي ڊينيچريشن | 94 ℃ | 5 منٽ | 1 |
| ڊينيچريشن | 94 ℃ | 30 سيڪنڊ | 35 |
| اينيلنگ | 50-60 ℃ | 30 سيڪنڊ | |
| واڌ | 72 ℃ | 30-60 سيڪنڊ/kb | |
| آخري واڌ | 72 ℃ | 10 منٽ | 1 |
| رکو | 4 ℃ | - | 1 |
1. ايم جي2+ ڪنسنٽريشن: هن پراڊڪٽ ۾ 3 ملي ميٽر MgCl آهي2، گھڻن پي سي آر رد عملن لاءِ موزون.
2. اينيلنگ گرمي پد: مھرباني ڪري پرائمر جي نظرياتي Tm قدر جو حوالو ڏيو. اينيلنگ گرمي پد پرائمر جي نظرياتي قدر کان 2-5 ℃ گھٽ تي سيٽ ڪري سگھجي ٿو.
3. واڌ جو وقت: ماليڪيولر سڃاڻپ لاءِ، 30 سيڪنڊ/kb سفارش ڪئي وئي آهي. جين ڪلوننگ لاءِ، 60 سيڪنڊ/kb سفارش ڪئي وئي آهي.
نوٽس
1. 2× PCR ماسٽر مڪس سان گڏ PCR پراڊڪٽس پولي ايڪريلامائيڊ جيل اليڪٽروفورسس لاءِ مناسب نه آهن.
2. توهان جي حفاظت ۽ صحت لاءِ، مهرباني ڪري آپريشن دوران ليبارٽري ڪوٽ ۽ ڊسپوزيبل دستانا پائڻ.
3. اهو صرف تحقيق جي استعمال لاءِ استعمال ٿيندو آهي!