Magnetni univerzalni komplet za virusno DNA/RNA HYD521
Komplet Magnetic Universal Viral DNA/RNA je primeren za ekstrakcijo virusne nukleinske kisline iz polne krvi ali telesnih tekočin brez celic (kot so serum, plazma, cerebrospinalna tekočina, brisi nosu/žrela, tekočina iz alveolarne lavaže itd.). Ta metoda uporablja tehnologijo čiščenja z magnetnimi kroglicami in med postopkom ekstrakcije ni potrebna ekstrakcija s strupenim fenol-kloroformom. Je varna, nestrupena in hitra. Pridobljeni produkt se lahko neposredno uporablja v PCR, qPCR, sekvenciranju druge generacije in drugih poskusih. Z uporabo z avtomatiziranimi instrumenti za ekstrakcijo z magnetnimi kroglicami je mogoče doseči visoko zmogljivo ekstrakcijo nukleinskih kislin.
Informacije o izdelku
| Komponente | 48T |
| Raztopina za lizo in vezavo | 33 ml |
| Magnetna suspenzija kroglic | 1,1 ml |
| Pralni pufer A | 40 ml |
| Pralni pufer B | 80 ml |
| Elucijska raztopina | 10 ml |
| Proteinaza K | 1,1 ml |
Pogoji shranjevanja
Proteinazo K je treba shranjevati pri temperaturi od 2 do 8 ℃, ostale sestavine pa pri sobni temperaturi. Rok uporabnosti je 18 mesecev.
Vzorčni opis
1. Uporabne vrste vzorcev: polna kri, serum, plazma, cerebrospinalna tekočina, brisi nosu/žrela, tekočina za izpiranje alveolarnih votlin in drugi vzorci.
2. Shranjevanje in transport vzorcev: Vzorce lahko takoj uporabite za testiranje ali pa jih shranite pri -70 ℃ ali nižji temperaturi. Obdobje skladiščenja je 6 mesecev. Izogibajte se ponavljajočemu se zamrzovanju in odmrzovanju. Vzorci se prevažajo po hladni verigi.
3. Zahteve glede zamrzovanja in odmrzovanja: Hitro zamrzovanje in odmrzovanje, izogibajte se ponavljajočemu se zamrzovanju in odmrzovanju.
Operacija
Pred poskusom preverite, ali se v raztopini izločajo oborine in ali je mogoče magnetne kroglice resuspendirati.
1. V 1,5 mL centrifugalno epruveto prenesite 200–300 μL vzorca, zaporedoma dodajte 600 μL raztopine za lizo in vezavo, 20 μL proteinaze K in 20 μL suspenzije magnetnih kroglic ter mešajte z vrtinčenjem pri visoki hitrosti 30 sekund. Inkubirajte pri 50 ℃ 5–7 minut. Če termostat nima funkcije nihanja, mešajte z vrtinčenjem 3-krat med inkubacijo, vsakič po 15 sekund.
2. Prenesite v 1,5 mL magnetno stojalo za magnetno ločevanje, dokler raztopina ni bistra in prozorna, nato pa jo zavrzite.
3. Dodajte 700 μL pufra za izpiranje A, mešajte v vrtincu 10 sekund, da razbijete magnetne kroglice, nato pa prenesite na magnetno stojalo za magnetno ločevanje, dokler raztopina ni bistra, in jo zavrzite.
4. Dodajte 700 μL pufra za izpiranje B, mešajte v vrtincu 10 sekund, da razbijete magnetne kroglice, prenesite na magnetno stojalo za magnetno ločevanje, dokler raztopina ni bistra, in jo zavrzite.
5. Ponovno dodajte 700 μL pufra za izpiranje B, mešajte v vrtincu 10 sekund, da razbijete magnetne kroglice, prenesite na magnetno stojalo za magnetno ločevanje, dokler raztopina ni bistra, in jo zavrzite.
6. Na kratko centrifugirajte, da zberete kapljice na steni epruvete, prenesite na magnetno stojalo za čiščenje in absorbirajte preostalo tekočino. Sušite na zraku 3–5 minut.
Opomba: Ostanki etanola bodo zavirali nadaljnje encimske reakcije, zato se prepričajte, da etanol med sušenjem popolnoma izhlapi. Ne sušite predolgo, da ne bi vplivali na učinek nadaljnje elucije.
7. Dodajte 40–100 μL elucijske raztopine in mešajte v vrtincu pri visoki hitrosti 2–3 minute, da razbijete magnetne kroglice. Inkubirajte pri 60 ℃ 5 minut, nato mešajte v vrtincu pri visoki hitrosti 60 sekund.
8. S takojšnjo centrifugo zberite tekočino s pokrovčka epruvete in jo prenesite na magnetni nosilec, dokler se magnetne kroglice popolnoma ne adsorbirajo. Nato tekočino previdno prenesite v novo centrifugalno epruveto, da dobite raztopino nukleinske kisline.
9. Raztopino nukleinske kisline lahko shranjujete pri -20 °C za kratkotrajno shranjevanje in -80 °C za dolgotrajno shranjevanje.
Opombe
1. Različni pufri v tem kompletu vsebujejo gvanidinske soli. Zaradi vaše varnosti in zdravja nosite laboratorijski plašč in rokavice za enkratno uporabo. In ravnajte v skladu z varnostnimi standardi. Pazite, da pufer ne pride v stik s kožo, očmi in sluznicami. Če se to zgodi, takoj sperite z veliko vode in poiščite zdravniško pomoč.
2. Če se raztopina obori, jo je treba pred uporabo okopati v vodi s temperaturo 30 ℃, dokler se oborina popolnoma ne raztopi.
3. Če je suspenzija magnetnih kroglic zamrznjena, je ne uporabljajte.
4. Različni pufri v tem kompletu vsebujejo gvanidinske soli. Za njihovo obdelavo ne uporabljajte oksidativnih razkužil, kot je natrijev hipoklorit, saj se bodo sicer sproščali strupeni plini, ki jih je treba odvreči kot medicinske odpadke.
5. Med elucijo lahko ostanejo ostanki magnetnih kroglic. Pri aspiraciji vzorcev se poskušajte izogniti vdihavanju magnetnih kroglic.