Meafaigaluega Fa'amagnetika mo le DNA/RNA Viral Lautele HYD521
O le Magnetic Universal Viral DNA/RNA Kit e talafeagai mo le aveeseina o le viral nucleic acid mai le toto atoa po'o vai o le tino e leai ni sela (e pei o le serum, plasma, cerebrospinal fluid, nasal/pharyngeal swabs, alveolar lavage fluid, ma isi). O lenei metotia e fa'aogaina ai le tekinolosi fa'amamāina o le magnetic bead, ma e le mana'omia le aveeseina o le phenol chloroform oona i le taimi o le fa'agasologa o le aveeseina. E saogalemu, e le oona ma vave. O le oloa ua maua e mafai ona fa'aoga sa'o i le PCR, qPCR, fa'asologa o le tupulaga lona lua ma isi fa'ata'ita'iga. A fa'aogaina fa'atasi ma meafaigaluega fa'aoso otometi o le magnetic bead, e mafai ona ausia le aveeseina maualuga o nucleic acids.
Fa'amatalaga oloa
| Vaega | 48T |
| Lysis ma le Fofo Fa'apipi'i | 33 mL |
| Fa'a'au'au o le pulu maneta | 1.1 mL |
| Mea e fufulu ai le pa A | 40 mL |
| Mea e fufulu ai le pa B | 80 mL |
| Vai fa'asu'i | 10 mL |
| Porotini K | 1.1 mL |
Tuutuuga o le Teuina
E tatau ona teuina le Proteinase K i le 2~8℃ ma o isi mea e fai ai e tatau ona teuina i le vevela o le potu. E 18 masina le umi e teu ai.
Fa'amatalaga Fa'ata'ita'i
1. Ituaiga fa'ata'ita'iga talafeagai: toto atoa, serum, plasma, sua o le fai'ai, sua o le isu/fa'a'ī, sua o le alveolar lavage ma isi fa'ata'ita'iga.
2. Teuina ma felauaiga o faʻataʻitaʻiga: E mafai ona faʻaaogaina faʻataʻitaʻiga mo le faia o suʻega i le taimi lava lea pe teuina i le -70℃ pe maualalo ifo mo le faia o suʻega. O le umi e teu ai e 6 masina. E tatau ona ʻalofia le faʻaʻaisa ma le faʻamaluluina soo. E feaveaʻi faʻataʻitaʻiga i le filifili malulu.
3. Mana'oga mo le fa'a'aisa ma le fa'amaluluina: Vave ona fa'a'aisa ma le fa'amaluluina, 'alo'ese mai le fa'a'aisa ma le fa'amaluluina soo.
Fa'agaioiga
A'o le'i faia le fa'ata'ita'iga, siaki pe iai ni fa'aputuga i le vaila'au ma pe mafai ona toe fa'asusu ni polo maneta.
1. Fa'aliliu le 200~300 μL o le fa'ata'ita'iga i totonu o se paipa centrifuge e 1.5 mL, fa'aopoopo i ai le 600 μL o le Lysis and Binding Solution, 20 μL o le Proteinase K, ma le 20 μL o le magnetic bead suspension i le fa'asologa, ma fa'avilivili i le saoasaoa maualuga mo le 30 sekone. Fa'avilivili i le 50℃ mo le 5~7 minute. Afai e leai se galuega fa'avilivili a le thermostat, fa'avilivili fa'atolu i le taimi o le fa'avilivili, i taimi ta'itasi mo le 15 sekone.
2. Fa'aliliu i totonu o se tulaga fa'amagnetisi e 1.5 mL mo le vavae'eseina fa'amagnetisi se'ia manino ma manino le vaila'au, ona lafoa'i lea o le vaila'au.
3. Fa'aopopo le 700 μL o le wash buffer A, fa'aoso mo le 10 sekone e fa'avaevae ai le magnetic beads, ona fa'aliliu lea i se tulaga magnetic mo le tu'ueseeseina o le magnetic se'ia o'o ina manino le vaila'au, ma lafoa'i le vaila'au.
4. Fa'aopopo le 700 μL o le wash buffer B, fa'aoso le vai mo le 10 sekone e fa'avaevae ai le magnetic beads, fa'aliliu i se tulaga magnetic mo le vavae'eseina o le magnetic se'ia o'o ina manino le vaila'au, ma lafoa'i le vaila'au.
5. Toe fa'aopopo le 700 μL o le wash buffer B, fa'aoso le vai mo le 10 sekone e fa'a'ese'ese ai le magnetic beads, fa'aliliu i se tulaga magnetic mo le tu'ueseeseina o le magnetic se'ia o'o ina manino le vaila'au, ma lafoa'i le vaila'au.
6. Fa'asolo mo sina taimi pu'upu'u e aoina ai ni mataua i luga o le puipui o le paipa, ona tu'u lea i se tulaga fa'amagneti e fa'amalamalama ai, ma mitiia le vai o totoe. Fa'amago i le ea mo le 3-5 minute.
Manatua: O toega o le ethanol o le a taofia ai gaioiga o le enzyme, o lea ia mautinoa ua liu suavai atoa le ethanol pe a mago. Aua le fa'amago mo se taimi umi tele ina ia 'alofia ai le a'afia ai o le aafiaga o le elution mulimuli ane.
7. Fa'aopopo le 40~100 μL o le Elution solution, fa'avilivili i le saoasaoa maualuga mo le 2~3 minute e fa'a'ese'ese ai le magnetic beads. Fa'asusu i le 60℃ mo le 5 minute, ona fa'avilivili lea i le saoasaoa maualuga mo le 60 sekone.
8. Fa'asolo vave le masini e aoina ai le vai mai le tapuni o le paipa ma fa'aliliu atu i le fata maneta se'ia o'o ina mitiia atoa ia mea maneta. Ona fa'aliliu lea ma le fa'aeteete o le vai i se paipa fou e maua ai le vaila'au o le nucleic acid.
9. E mafai ona teuina le vailaʻau nucleic acid i le -20°C mo le teuina i se taimi puʻupuʻu ma le -80°C mo le teuina i se taimi umi.
Fa'amatalaga
1. O mea fa'apipi'i eseese o lo'o i totonu o lenei pusa meafaigaluega o lo'o i ai masima guanidine. Mo lou saogalemu ma le soifua maloloina, fa'amolemole ia ofuina se ofu su'esu'e ma ni totigilima e lafoa'i. Ma ia taulimaina e tusa ai ma puipuiga fa'atulagaina o le saogalemu. Aua ne'i tu'u le mea fa'apipi'i e pa'i atu i le pa'u, mata ma membrane mucous. Afai e tupu, fa'amolemole fufulu loa i le tele o le vai ma saili se fesoasoani fa'afoma'i.
2. Afai e fa'aputu le vaila'au, e mana'omia ona fa'amamā i le vai e 30℃ se'ia o'o ina liu suavai atoa le vaila'au a'o le'i fa'aaogaina.
3. Afai ua aisa le fa'amamago o le bead, aua le fa'aaogaina.
4. O mea fa'amama eseese i totonu o lenei pusa meafaigaluega o lo'o i ai masima guanidine. Aua le fa'aaogaina ni vaila'au fa'amamā e pei o le sodium hypochlorite e togafitia ai, a leai o le a fa'asa'olotoina ai kasa o'ona ma e tatau ona togafitia o ni otaota fa'afoma'i.
5. Atonu e iai ni fasi maneta e totoe i le taimi o le elution. Taumafai e 'alo'ese mai le manavaina o fasi maneta pe a mitiia ni fa'ata'ita'iga.