2× PCR Premix (me Ngjyrues) HYA442
Përzierja Master 2× PCR përmban Taq DNA Polimerazë, dNTP dhe përbërës të tjerë të kërkuar për PCR. Përzierja Master është e qëndrueshme për 3 muaj në 4℃ me stabilizuesit tanë të personalizuar. Tretësira e para-përzierjes është e optimizuar për PCR konvencionale dhe gati për t’u përdorur duke shtuar shabllon ADN-je dhe prajmera. Produktet PCR mund të ngarkohen direkt për elektroforezë me ngjyrë blu bromofenoli të para-ngarkuar. Produktet e amplifikuara përmbajnë zgjatim 3'-dA dhe mund të klonohen lehtësisht në vektorin T. Përzierja Master 2× PCR thjeshton procedurën e PCR dhe zvogëlon kontaminimin.
Komponentët
| Komponentët | Madhësia-1 | Madhësia-2 | Madhësia-3 |
| 2× PCR Premix (me Ngjyrues) | 5 ml | 1 mL×15 | 1 mL×50 |
Hapësirë ruajtëse
Ruajeni në -20°C për 2 vjet.
Udhëzime
1. Sistemi i Reagimit
| Komponentët | Vëllimi |
| 2× PCR Premix (me Ngjyrues) | 25 uL |
| Abetare Forward (10 μM) | 2 µL |
| Abetare e kundërt (10 μM) | 2 µL |
| Shablloni i ADN-së* | Variabli |
| ddH2I | Deri në 50 µL |
*Përdorimi i shabllonit: 50-200 ng ADN gjenomike; 0,1-10 ng ADN plazmide
2. Programi i Reagimit
| Hapi | Temperatura | Koha | Cikle |
| Denatyrimi fillestar | 94 ℃ | 5 minuta | 1 |
| Denatyrimi | 94 ℃ | 30 sekonda | 35 |
| Pjekja | 50-60 ℃ | 30 sekonda | |
| Zgjerim | 72 ℃ | 30-60 sek/kb | |
| Zgjatja përfundimtare | 72 ℃ | 10 minuta | 1 |
| Mbaj | 4 ℃ | - | 1 |
1. Mg2+ përqendrimi: Ky produkt përmban 3 mM MgCl2, i përshtatshëm për shumicën e reaksioneve PCR.
2. Temperatura e pjekjes: Ju lutemi referojuni vlerës teorike Tm të prajmerëve. Temperatura e pjekjes mund të vendoset 2-5℃ më e ulët se vlera teorike e prajmerit.
3. Koha e zgjatjes: Për identifikimin molekular, rekomandohet 30 sek/kb. Për klonimin e gjeneve, rekomandohet 60 sek/kb.
Shënime
1. Produktet PCR me 2× PCR Master Mix nuk janë të përshtatshme për elektroforezën në xhel poliakrilamid.
2. Për sigurinë dhe shëndetin tuaj, ju lutemi vishni uniforma laboratori dhe doreza njëpërdorimshe gjatë punës.
3. Përdoret VETËM për qëllime kërkimore!