Kit Magnetik Universal Viral DNA/ARN HYD521
Kit Magnetik Universal Viral DNA/ARN është i përshtatshëm për nxjerrjen e acidit nukleik viral nga gjaku i plotë ose lëngjet trupore pa qeliza (si serumi, plazma, lëngu cerebrospinal, tamponët nazal/farinjor, lëngu i lavazhit alveolar, etj.). Kjo metodë përdor teknologjinë e pastrimit të sferave magnetike dhe nuk kërkohet nxjerrje toksike me fenol kloroform gjatë procesit të nxjerrjes. Është e sigurt, jo-toksike dhe e shpejtë. Produkti i përftuar mund të përdoret direkt në PCR, qPCR, sekuencimin e gjeneratës së dytë dhe eksperimente të tjera. Kur përdoret me instrumente të nxjerrjes automatike me sfera magnetike, mund të arrihet nxjerrje me rendiment të lartë të acideve nukleike.
Informacion mbi produktin
| Komponentët | 48T |
| Tretësira e lizës dhe lidhjes | 33 ml |
| Pezullim magnetik me rruaza | 1.1 mL |
| Tamponi larës A | 40 ml |
| Tamponi larës B | 80 ml |
| Tretësirë elucioni | 10 ml |
| Proteinaza K | 1.1 mL |
Kushtet e Ruajtjes
Proteinaza K duhet të ruhet në 2~8℃ dhe përbërësit e tjerë duhet të ruhen në temperaturë ambienti. Afati i ruajtjes është 18 muaj.
Përshkrimi i Shembullit
1. Llojet e mostrave të aplikueshme: gjak i plotë, serum, plazmë, lëng cerebrospinal, tampona nazale/faringjesh, lëng lavazh alveolar dhe mostra të tjera.
2. Ruajtja dhe transportimi i mostrave: Mostrat mund të përdoren për testim menjëherë ose të ruhen në -70℃ ose më poshtë për testim. Periudha e ruajtjes është 6 muaj. Duhet të shmanget ngrirja dhe shkrirja e përsëritur. Mostrat transportohen me zinxhir të ftohtë.
3. Kërkesat për ngrirje-shkrirje: Ngrirje dhe shkrirje e shpejtë, shmangni ngrirjen dhe shkrirjen e përsëritur.
Operacioni
Përpara eksperimentit, kontrolloni nëse tretësira ka reshje dhe nëse kokrrat magnetike mund të resuspendohen.
1. Transferoni 200~300 μL të mostrës në një tub centrifuge 1.5 mL, shtoni 600 μL të Tretësirës së Lizës dhe Lidhjes, 20 μL të Proteinazës K dhe 20 μL të pezullimit të sferave magnetike në sekuencë dhe përzieni në vorteks me shpejtësi të lartë për 30 sekonda. Inkubojeni në 50℃ për 5~7 minuta. Nëse termostati nuk ka funksion lëkundjeje, përzieni në vorteks 3 herë gjatë periudhës së inkubacionit, çdo herë për 15 sekonda.
2. Transferojeni në një mbajtëse magnetike prej 1.5 mL për ndarje magnetike derisa tretësira të jetë e kthjellët dhe transparente, dhe hidheni tretësirën.
3. Shtoni 700 μL të tamponit larës A, përziejini në vorteks për 10 sekonda për të thyer sferat magnetike dhe më pas transferojini në një mbajtëse magnetike për ndarje magnetike derisa tretësira të jetë e kthjellët dhe hidheni tretësirën.
4. Shtoni 700 μL të tamponit larës B, përziejini në vorteks për 10 sekonda për të thyer sferat magnetike, transferojini në një stendë magnetike për ndarje magnetike derisa tretësira të jetë e kthjellët dhe hidheni tretësirën.
5. Shtoni përsëri 700 μL të tamponit larës B, përziejini në vorteks për 10 sekonda për të thyer sferat magnetike, transferojini në një stendë magnetike për ndarje magnetike derisa tretësira të jetë e kthjellët dhe hidheni tretësirën.
6. Centrifugojeni shkurtimisht për të mbledhur pikat në murin e tubit, transferojeni në një mbajtëse magnetike për sqarim dhe thithni lëngun e mbetur. Thajeni në ajër për 3-5 minuta.
Shënim: Mbetjet e etanolit do të pengojnë reaksionet e mëvonshme enzimatike, prandaj sigurohuni që etanoli të avullojë plotësisht gjatë tharjes. Mos e thani për shumë kohë për të shmangur ndikimin në efektin e mëvonshëm të elucionit.
7. Shtoni 40~100 μL tretësirë Elution, përzieni në vorteks me shpejtësi të lartë për 2~3 minuta për të thyer sferat magnetike. Inkubojeni në 60℃ për 5 minuta, pastaj përzieni në vorteks me shpejtësi të lartë për 60 sekonda.
8. Centrifugoni menjëherë për të mbledhur lëngun nga kapaku i tubit dhe transferojeni atë në raftin magnetik derisa kokrrat magnetike të adsorbohen plotësisht. Pastaj transferoni me kujdes lëngun në një tub të ri centrifuge për të marrë tretësirën e acidit nukleik.
9. Tretësira e acidit nukleik mund të ruhet në -20°C për ruajtje afatshkurtër dhe në -80°C për ruajtje afatgjatë.
Shënime
1. Tamponët e ndryshëm në këtë komplet përmbajnë kripëra guanidine. Për sigurinë dhe shëndetin tuaj, ju lutemi vishni një uniformë laboratori dhe doreza njëpërdorimshe. Dhe trajtojeni sipas masave paraprake standarde të sigurisë. Mos lejoni që tamponi të bjerë në kontakt me lëkurën, sytë dhe mukozën. Nëse ndodh, ju lutemi shpëlajeni menjëherë me shumë ujë dhe kërkoni ndihmë mjekësore.
2. Nëse tretësira precipiton, ajo duhet të lahet në ujë 30℃ derisa precipitati të tretet plotësisht para përdorimit.
3. Nëse pezullimi i sferave magnetike është i ngrirë, mos e përdorni.
4. Tamponët e ndryshëm në këtë komplet përmbajnë kripëra guanidine. Mos përdorni dezinfektantë oksidues si hipoklorit natriumi për t'i trajtuar ato, përndryshe do të çlirohen gazra toksikë dhe ato duhet të trajtohen si mbetje mjekësore.
5. Mund të ketë sfera magnetike të mbetura gjatë eluimit. Përpiquni të shmangni thithjen e sferave magnetike kur thithni mostrat.