2× ПЦР премикс (са бојом) HYA442
2× PCR мастер микс садржи Taq ДНК полимеразу, dNTP-ове и друге компоненте потребне за PCR. Мастер микс је стабилан 3 месеца на 4℃ са нашим прилагођеним стабилизаторима. Раствор претходног мешања је оптимизован за конвенционалну PCR и спреман је за употребу додавањем ДНК шаблона и прајмера. PCR производи се могу директно учитати за електрофорезу са претходно учитаном бромофенол плавом бојом. Амплификовани производи садрже 3'-dA избочину и могу се лако клонирати у Т вектор. 2× PCR мастер микс поједностављује PCR процедуру и смањује контаминацију.
Компоненте
| Компоненте | Величина-1 | Величина-2 | Величина-3 |
| 2× ПЦР премикс (са бојом) | 5 мл | 1 мл × 15 | 1 мл × 50 |
Складиштење
Чувати на температури од -20°C током 2 године.
Упутства
1. Систем реакција
| Компоненте | Јачина звука |
| 2× ПЦР премикс (са бојом) | 25 μL |
| Прајмер за предњи слој (10 μM) | 2 µL |
| Обрнути прајмер (10 μM) | 2 µL |
| ДНК шаблон* | Променљива |
| ддХ2ТО | До 50 µL |
*Употреба шаблона: 50-200 нг геномске ДНК; 0,1-10 нг плазмидне ДНК
2. Програм реакције
| Корак | Температура | Време | Циклуси |
| Почетна денатурација | 94 ℃ | 5 мин | 1 |
| Денатурација | 94 ℃ | 30 секунди | 35 |
| Жарење | 50-60 ℃ | 30 секунди | |
| Продужетак | 72 ℃ | 30-60 сек/кб | |
| Последње продужење | 72 ℃ | 10 мин | 1 |
| Задржите | 4 ℃ | - | 1 |
1. Мг2+ концентрација: Овај производ садржи 3 mM MgCl2, погодан за већину PCR реакција.
2. Температура жарења: Молимо погледајте теоријску Tm вредност прајмера. Температура жарења може бити подешена на 2-5℃ ниже од теоријске вредности прајмера.
3. Време продужења: За молекуларну идентификацију препоручује се 30 сек/kb. За клонирање гена препоручује се 60 сек/kb.
Белешке
1. PCR производи са 2× PCR Master Mix нису погодни за електрофорезу у полиакриламидном гелу.
2. Ради ваше безбедности и здравља, носите лабораторијске мантиле и рукавице за једнократну употребу током рада.
3. Користи се САМО у истраживачке сврхе!