Магнетни универзални комплет за вирусну ДНК/РНК HYD521
Универзални магнетни комплет за вирусну ДНК/РНК је погодан за екстракцију вирусне нуклеинске киселине из пуне крви или телесних течности без ћелија (као што су серум, плазма, цереброспинална течност, брисеви носа/ждрела, течност за алвеоларно лаважирање итд.). Ова метода користи технологију пречишћавања магнетним перлама и није потребна екстракција токсичним фенол-хлороформом током процеса екстракције. Безбедна је, нетоксична и брза. Добијени производ се може директно користити у PCR, qPCR, секвенцирању друге генерације и другим експериментима. Када се користи са инструментима за аутоматизовану екстракцију магнетним перлама, може се постићи екстракција нуклеинских киселина високог протока.
Информације о производу
| Компоненте | 48Т |
| Раствор за лизу и везивање | 33 мл |
| Суспензија магнетних перли | 1,1 мл |
| Пуфер за прање А | 40 мл |
| Пуфер за прање Б | 80 мл |
| Раствор за елуирање | 10 мл |
| Протеиназа К | 1,1 мл |
Услови складиштења
Протеиназу К треба чувати на температури од 2 до 8 ℃, а остале састојке на собној температури. Рок трајања је 18 месеци.
Пример описа
1. Применљиве врсте узорака: пуна крв, серум, плазма, цереброспинална течност, брисеви из носа/ждрела, течност за алвеоларно лаважирање и други узорци.
2. Чување и транспорт узорака: Узорци се могу одмах користити за тестирање или чувати на -70℃ или ниже за тестирање. Период складиштења је 6 месеци. Треба избегавати поновљено замрзавање и одмрзавање. Узорци се транспортују хладним ланцем.
3. Захтеви за замрзавање и одмрзавање: Брзо замрзавање и одмрзавање, избегавајте поновљено замрзавање и одмрзавање.
Операција
Пре експеримента, проверите да ли раствор садржи талог и да ли се магнетне куглице могу ресуспендовати.
1. Пребаците 200~300 μL узорка у епрувету за центрифугу од 1,5 mL, додајте 600 μL раствора за лизу и везивање, 20 μL протеиназе К и 20 μL суспензије магнетних куглица редом и вртложите великом брзином 30 секунди. Инкубирајте на 50℃ током 5~7 минута. Ако термостат нема функцију осцилације, вртложите 3 пута током периода инкубације, сваки пут по 15 секунди.
2. Пребаците у магнетни сталак од 1,5 mL за магнетну сепарацију док раствор не постане бистар и провидан, а затим баците раствор.
3. Додајте 700 μL пуфера за прање А, мућкајте на вортексу 10 секунди да бисте разбили магнетне перле, а затим пребаците на магнетни сталак за магнетну сепарацију док раствор не постане бистар и баците раствор.
4. Додати 700 μL пуфера за прање Б, вртложити 10 секунди да би се разбиле магнетне куглице, пребацити на магнетни сталак за магнетну сепарацију док раствор не постане бистар и одбацити раствор.
5. Поново додајте 700 μL пуфера за прање Б, вртложите 10 секунди да бисте разбили магнетне перле, пребаците на магнетни сталак за магнетну сепарацију док раствор не постане бистар и баците раствор.
6. Центрифугирајте кратко да бисте сакупили капљице на зиду епрувете, пребаците на магнетни сталак ради бистрења и апсорбујте преосталу течност. Сушите на ваздуху 3-5 минута.
Напомена: Остаци етанола ће инхибирати накнадне ензимске реакције, зато се уверите да етанол потпуно испари током сушења. Не сушите предуго да бисте избегли утицај на накнадни ефекат елуирања.
7. Додати 40~100 μL раствора за елуирање, вртложити великом брзином 2~3 минута да би се разбиле магнетне куглице. Инкубирати на 60℃ током 5 минута, затим вртложити великом брзином 60 секунди.
8. Инстант центрифугирајте да бисте сакупили течност са поклопца епрувете и пребаците је на магнетни сталак док се магнетне куглице потпуно не адсорбују. Затим пажљиво пребаците течност у нову центрифугалну епрувету да бисте добили раствор нуклеинске киселине.
9. Раствор нуклеинске киселине може се чувати на -20°C за краткорочно складиштење и -80°C за дугорочно складиштење.
Белешке
1. Различити пуфери у овом комплету садрже гванидин соли. Ради ваше безбедности и здравља, носите лабораторијски мантил и рукавице за једнократну употребу. И рукујте у складу са безбедносним стандардима. Не дозволите да пуфер дође у контакт са кожом, очима и слузокожом. Уколико се то деси, одмах исперите са доста воде и потражите медицинску помоћ.
2. Ако се раствор таложи, потребно га је пре употребе потопити у воду температуре 30℃ док се талог потпуно не раствори.
3. Ако је суспензија магнетних перли замрзнута, немојте је користити.
4. Различити пуфери у овом комплету садрже гванидин соли. Не користите оксидујућа дезинфекциона средства као што је натријум хипохлорит за њихов третман, у супротном ће се ослободити токсични гасови и морају се третирати као медицински отпад.
5. Током елуирања могу постојати заостале магнетне перле. Покушајте да избегнете удисање магнетних перли приликом аспирације узорака.