2× PCR Premix （kalayan Pewarna） HYA442
2× PCR Master Mix ngandung Taq DNA Polymerase, dNTPs, sareng komponén sanés anu diperyogikeun PCR. Master Mix stabil salami 3 bulan dina suhu 4℃ nganggo stabilisator khusus kami. Larutan pra-campuran dioptimalkeun pikeun PCR konvensional sareng siap dianggo ku nambihan citakan DNA sareng primer. Produk PCR tiasa dimuat langsung pikeun éléktroforésis nganggo pewarna biru bromofenol anu parantos dimuat. Produk anu diamplifikasi ngandung tonjolan 3'-dA sareng tiasa gampang diklon kana véktor T. 2× PCR Master Mix ngagampangkeun prosedur PCR sareng ngirangan kontaminasi.
Komponen
| Komponen | Ukuran-1 | Ukuran-2 | Ukuran-3 |
| 2× PCR Premix (kalayan Pewarna) | 5mL | 1 ml × 15 | 1 ml × 50 |
Panyimpenan
Simpen dina suhu -20°C salami 2 taun.
Pitunjuk
1. Sistem Réaksi
| Komponen | Volume |
| 2× PCR Premix (kalayan Pewarna) | 25 uL |
| Primer Maju (10 μM) | 2 µL |
| Primer Balik (10 μM) | 2 µL |
| Citakan DNA* | Variabel |
| ddH2KA | Nepi ka 50 µL |
* Pamakéan template: 50-200 ng DNA génomik; 0,1-10 ng plasmid DNA
2. Program Réaksi
| Léngkah | Suhu | Waktos | Siklus |
| Denaturasi Awal | 94 ℃ | 5 menit | 1 |
| Denaturasi | 94 ℃ | 30 detik | 35 |
| Pangerasan | 50-60 ℃ | 30 detik | |
| Ékstensi | 72 ℃ | 30-60 detik/kb | |
| Perpanjangan Akhir | 72 ℃ | 10 menit | 1 |
| Tahan | 4 ℃ | - | 1 |
1. Mg2+ konsentrasi: Produk ieu ngandung 3 mM MgCl2, cocog pikeun kaseueuran réaksi PCR.
2. Suhu annealing: Mangga tingal nilai Tm téoritis tina primer. Suhu annealing tiasa disetel ka 2-5 ℃ langkung handap tibatan nilai téoritis primer.
3. Waktos perpanjangan: Pikeun idéntifikasi molekuler, 30 detik/kb disarankeun. Pikeun kloning gén, 60 detik/kb disarankeun.
Catetan
1. Produk PCR nganggo 2× PCR Master Mix henteu cocog pikeun éléktroforésis gél poliakrilamida.
2. Pikeun kasalametan sareng kasehatan anjeun, punten nganggo jas lab sareng sarung tangan anu tiasa dianggo sakali nalika operasi.
3. Ieu ngan dianggo kanggo panalungtikan wungkul!