Magnetisk universell viral DNA/RNA-kit HYD521
Magnetic Universal Viral DNA/RNA Kit är lämpligt för att extrahera viral nukleinsyra från helblod eller cellfria kroppsvätskor (såsom serum, plasma, cerebrospinalvätska, näs-/svalgprover, alveolär lavagevätska etc.). Denna metod använder reningsteknik för magnetisk kula, och ingen extraktion med giftig fenolkloroform krävs under extraktionsprocessen. Den är säker, giftfri och snabb. Den erhållna produkten kan användas direkt i PCR, qPCR, andra generationens sekvensering och andra experiment. Vid användning med automatiserade extraktionsinstrument med magnetiska kulor kan högkapacitetsextraktion av nukleinsyror uppnås.
Produktinformation
| Komponenter | 48T |
| Lys- och bindningslösning | 33 ml |
| Magnetisk pärlupphängning | 1,1 ml |
| Tvättbuffert A | 40 ml |
| Tvättbuffert B | 80 ml |
| Elueringslösning | 10 ml |
| Proteinas K | 1,1 ml |
Lagringsförhållanden
Proteinas K bör förvaras vid 2–8 ℃ och övriga ingredienser bör förvaras i rumstemperatur. Hållbarheten är 18 månader.
Exempelbeskrivning
1. Tillämpliga provtyper: helblod, serum, plasma, cerebrospinalvätska, näs-/svalgprover, alveolär lavagevätska och andra prover.
2. Provförvaring och transport: Prover kan användas för testning omedelbart eller förvaras vid -70 ℃ eller lägre. Förvaringsperioden är 6 månader. Upprepad frysning och upptining bör undvikas. Prover transporteras kylt.
3. Krav för frysning och upptining: Snabb frysning och upptining, undvik upprepad frysning och upptining.
Drift
Kontrollera före experimentet om lösningen har utfällning och om de magnetiska pärlorna kan återsuspenderas.
1. Överför 200–300 μL prov till ett 1,5 ml centrifugrör, tillsätt 600 μL lyserings- och bindningslösning, 20 μL proteinas K och 20 μL magnetisk kulsuspension i tur och ordning och virvelblanda med hög hastighet i 30 sekunder. Inkubera vid 50 ℃ i 5–7 minuter. Om termostaten inte har någon oscillationsfunktion, virvelblanda 3 gånger under inkubationsperioden, varje gång i 15 sekunder.
2. Överför till ett 1,5 ml magnetiskt stativ för magnetisk separation tills lösningen är klar och genomskinlig, och kassera lösningen.
3. Tillsätt 700 μL tvättbuffert A, vortexa i 10 sekunder för att bryta sönder de magnetiska pärlorna och överför sedan till ett magnetiskt stativ för magnetisk separation tills lösningen är klar och kassera lösningen.
4. Tillsätt 700 μL tvättbuffert B, vortexa i 10 sekunder för att bryta sönder de magnetiska pärlorna, överför till ett magnetiskt stativ för magnetisk separation tills lösningen är klar och kassera lösningen.
5. Tillsätt 700 μL tvättbuffert B igen, vortexa i 10 sekunder för att bryta sönder de magnetiska pärlorna, överför till ett magnetiskt stativ för magnetisk separation tills lösningen är klar och kassera lösningen.
6. Centrifugera kort för att samla upp droppar på rörväggen, överför till ett magnetiskt stativ för klarning och absorbera den återstående vätskan. Lufttorka i 3–5 minuter.
Obs: Etanolrester hämmar efterföljande enzymreaktioner, så se till att etanolen avdunstar helt vid torkning. Torka inte för länge för att undvika att påverka den efterföljande elueringseffekten.
7. Tillsätt 40–100 μL elueringslösning och virvla vid hög hastighet i 2–3 minuter för att bryta sönder de magnetiska pärlorna. Inkubera vid 60 ℃ i 5 minuter och virvla sedan vid hög hastighet i 60 sekunder.
8. Centrifugera direkt för att samla upp vätskan från rörets lock och överför den till magnetstället tills de magnetiska pärlorna är helt adsorberade. Överför sedan försiktigt vätskan till ett nytt centrifugrör för att erhålla nukleinsyralösningen.
9. Nukleinsyralösningen kan förvaras vid -20 °C för korttidsförvaring och -80 °C för långtidsförvaring.
Anteckningar
1. De olika buffertarna i detta kit innehåller guanidinsalter. För din säkerhet och hälsa, använd laboratorierock och engångshandskar. Hantera enligt säkerhetsstandardåtgärder. Låt inte bufferten komma i kontakt med hud, ögon och slemhinnor. Om det händer, skölj omedelbart med rikligt med vatten och sök läkarvård.
2. Om lösningen fälls ut, måste den sköljas i 30 ℃ vatten tills fällningen är helt upplöst före användning.
3. Om magnetkulsuspensionen är frusen, använd den inte.
4. De olika buffertarna i detta kit innehåller guanidinsalter. Använd inte oxiderande desinfektionsmedel som natriumhypoklorit för att behandla dem, annars kommer giftiga gaser att frigöras och de måste hanteras som medicinskt avfall.
5. Det kan finnas kvarvarande magnetiska pärlor under elueringen. Försök att undvika att inandas magnetiska pärlor vid aspiration av prover.