Mchanganyiko wa PCR wa 2× （na Rangi） HYA442
Mchanganyiko Mkuu wa PCR 2× una Taq DNA Polymerase, dNTPs, na vipengele vingine vinavyohitajika na PCR. Mchanganyiko Mkuu ni thabiti kwa miezi 3 kwa 4℃ ukitumia vidhibiti vyetu vilivyobinafsishwa. Suluhisho la mchanganyiko wa awali limeboreshwa kwa PCR ya kawaida na liko tayari kutumika kwa kuongeza kiolezo cha DNA na vitangulizi. Bidhaa za PCR zinaweza kupakiwa moja kwa moja kwa ajili ya elektrophoresis na rangi ya bluu ya bromophenol iliyopakiwa awali. Bidhaa zilizokuzwa zina utangulizi wa 3 '-dA na zinaweza kuunganishwa kwa urahisi kwenye vekta ya T. Mchanganyiko Mkuu wa PCR 2× hurahisisha utaratibu wa PCR na kupunguza uchafuzi.
Vipengele
| Vipengele | Ukubwa-1 | Ukubwa-2 | Ukubwa-3 |
| Mchanganyiko wa PCR wa 2× (na Rangi) | 5mL | 1 mL×15 | mL 1×50 |
Hifadhi
Hifadhi kwa -20°C kwa miaka 2.
Maelekezo
1. Mfumo wa Mwitikio
| Vipengele | Kiasi |
| Mchanganyiko wa PCR wa 2× (na Rangi) | 25 uL |
| Primer ya Mbele (10 μM) | 2 µL |
| Primer ya Kurudi nyuma (10 μM) | 2 µL |
| Kiolezo cha DNA* | Kinachobadilika |
| ddH2THE | Hadi 50 µL |
*Matumizi ya kiolezo: 50-200 ng genomic DNA; 0.1-10 ng plasmid DNA
2. Programu ya Mwitikio
| Hatua | Halijoto | Muda | Mizunguko |
| Uharibifu wa Awali | 94 ℃ | Dakika 5 | 1 |
| Uharibifu wa ngozi | 94 ℃ | Sekunde 30 | 35 |
| Kuweka annealing | 50-60 ℃ | Sekunde 30 | |
| Ugani | 72 ℃ | Sekunde 30-60/kb | |
| Upanuzi wa Mwisho | 72 ℃ | Dakika 10 | 1 |
| Shikilia | 4 ℃ | - | 1 |
1. Mg2+ mkusanyiko: Bidhaa hii ina 3 mM ya MgCl2, inafaa kwa athari nyingi za PCR.
2. Halijoto ya kunyonya: Tafadhali rejelea thamani ya kinadharia ya Tm ya vitangulizi. Halijoto ya kunyonya inaweza kuwekwa hadi 2-5℃ chini kuliko thamani ya kinadharia ya kitangulizi.
3. Muda wa Kupanua: Kwa utambuzi wa molekuli, sekunde 30/kb inapendekezwa. Kwa uundaji wa jeni, sekunde 60/kb inapendekezwa.
Vidokezo
1. Bidhaa za PCR zenye mchanganyiko mkuu wa PCR 2× hazifai kwa electrophoresis ya jeli ya polyacrylamide.
2. Kwa usalama na afya yako, tafadhali vaa koti za maabara na glavu zinazoweza kutumika mara moja kwa ajili ya upasuaji.
3. Inatumika kwa ajili ya utafiti PEKEE!