2× PCR ప్రీమిక్స్ (డైతో) HYA442
2× PCR మాస్టర్ మిక్స్లో టాక్ DNA పాలిమరేస్, dNTPలు మరియు PCRకు అవసరమైన ఇతర భాగాలు ఉంటాయి. మా ప్రత్యేకంగా రూపొందించిన స్టెబిలైజర్లతో ఈ మాస్టర్ మిక్స్ 4℃ వద్ద 3 నెలల పాటు స్థిరంగా ఉంటుంది. ఈ ప్రీ-మిక్స్ ద్రావణం సాంప్రదాయ PCR కోసం ఆప్టిమైజ్ చేయబడింది మరియు DNA టెంప్లేట్, ప్రైమర్లను జోడించడం ద్వారా ఉపయోగించడానికి సిద్ధంగా ఉంటుంది. ముందుగా లోడ్ చేయబడిన బ్రోమోఫెనాల్ బ్లూ డైతో PCR ఉత్పత్తులను ఎలక్ట్రోఫోరెసిస్ కోసం నేరుగా లోడ్ చేయవచ్చు. యాంప్లిఫై చేయబడిన ఉత్పత్తులలో 3'-dA ప్రోట్రూషన్ ఉంటుంది మరియు వీటిని T వెక్టర్లోకి సులభంగా క్లోన్ చేయవచ్చు. 2× PCR మాస్టర్ మిక్స్ PCR ప్రక్రియను సులభతరం చేస్తుంది మరియు కాలుష్యాన్ని తగ్గిస్తుంది.
భాగాలు
| భాగాలు | సైజు-1 | సైజు-2 | సైజు-3 |
| 2× PCR ప్రీమిక్స్ (డైతో) | 5 మి.లీ | 1 మి.లీ×15 | 1 మి.లీ×50 |
నిల్వ
-20°C వద్ద 2 సంవత్సరాల వరకు నిల్వ ఉంచండి.
సూచనలు
1. ప్రతిచర్య వ్యవస్థ
| భాగాలు | వాల్యూమ్ |
| 2× PCR ప్రీమిక్స్ (డైతో) | 25 uL |
| ఫార్వర్డ్ ప్రైమర్ (10 μM) | 2 µL |
| రివర్స్ ప్రైమర్ (10 μM) | 2 µL |
| DNA టెంప్లేట్* | వేరియబుల్ |
| ddH2ది | 50 µL వరకు |
*మూస వినియోగం: 50-200 ng జన్యుసంబంధమైన DNA; 0.1-10 ng ప్లాస్మిడ్ DNA
2. ప్రతిచర్య కార్యక్రమం
| దశ | ఉష్ణోగ్రత | సమయం | చక్రాలు |
| ప్రారంభ విరూపణ | 94 ℃ | 5 నిమిషాలు | 1 |
| విరూపణ | 94 ℃ | 30 సెకన్లు | 35 |
| అనీలింగ్ | 50-60 ℃ | 30 సెకన్లు | |
| పొడిగింపు | 72 ℃ | 30-60 సెకన్లు/కిలోబైట్ | |
| తుది పొడిగింపు | 72 ℃ | 10 నిమిషాలు | 1 |
| పట్టుకోండి | 4 ℃ | - | 1 |
1. మి.గ్రా2+ గాఢత: ఈ ఉత్పత్తిలో 3 mM MgCl ఉంటుంది2చాలా PCR చర్యలకు అనుకూలమైనది.
2. అనీలింగ్ ఉష్ణోగ్రత: దయచేసి ప్రైమర్ల సైద్ధాంతిక Tm విలువను చూడండి. అనీలింగ్ ఉష్ణోగ్రతను ప్రైమర్ యొక్క సైద్ధాంతిక విలువ కంటే 2-5℃ తక్కువగా సెట్ చేయవచ్చు.
3. పొడిగింపు సమయం: అణువుల గుర్తింపు కోసం, 30 సెకన్లు/kb సిఫార్సు చేయబడింది. జన్యు క్లోనింగ్ కోసం, 60 సెకన్లు/kb సిఫార్సు చేయబడింది.
గమనికలు
1. 2× PCR మాస్టర్ మిక్స్తో కూడిన PCR ఉత్పత్తులు పాలియాక్రిలమైడ్ జెల్ ఎలక్ట్రోఫోరెసిస్కు అనుకూలమైనవి కావు.
2. మీ భద్రత మరియు ఆరోగ్యం కోసం, దయచేసి ఆపరేషన్ సమయంలో ల్యాబ్ కోట్లు మరియు డిస్పోజబుల్ గ్లౌజులు ధరించండి.
3. ఇది కేవలం పరిశోధన కోసం మాత్రమే ఉపయోగించబడుతుంది!