Маҷмӯаи ДНК/РНК-и универсалии магнитии вирусӣ HYD521
Маҷмӯаи универсалии магнитии вирусӣ/РНК барои истихроҷи кислотаи нуклеинии вирусӣ аз моеъҳои хуни пурра ё беҳуҷайравии бадан (ба монанди зардоб, плазма, моеъи мағзи сар, тампонҳои бинӣ/халқӣ, моеъи шустани алвеолярӣ ва ғайра) мувофиқ аст. Ин усул аз технологияи тозакунии муҳраҳои магнитӣ истифода мебарад ва ҳангоми раванди истихроҷ истихроҷи хлороформи заҳролуди фенолӣ талаб карда намешавад. Он бехатар, заҳролуд ва зуд аст. Маҳсулоти бадастомада метавонад мустақиман дар PCR, qPCR, секвенсиякунии насли дуюм ва дигар таҷрибаҳо истифода шавад. Ҳангоми истифода бо асбобҳои истихроҷи автоматии муҳраҳои магнитӣ, истихроҷи баланди кислотаҳои нуклеинӣ ба даст оварда мешавад.
Маълумот дар бораи маҳсулот
| Ҷузъҳо | 48T |
| Маҳлули лизис ва пайвасткунӣ | 33 мл |
| Суспензияи муҳраҳои магнитӣ | 1.1 мл |
| Буфери шустушӯй A | 40 мл |
| Буфери шустушӯй B | 80 мл |
| Маҳлули элютсионӣ | 10 мл |
| Протеиназа К | 1.1 мл |
Шароити нигоҳдорӣ
Протеиназа К бояд дар ҳарорати 2~8°C ва дигар компонентҳо дар ҳарорати хонагӣ нигоҳ дошта шаванд. Мӯҳлати нигоҳдорӣ 18 моҳ аст.
Тавсифи намуна
1. Намудҳои намунаҳои дахлдор: хуни пурра, зардоб, плазма, моеъи мағзи сар, тампонҳои бинӣ/халқ, моеъи шустани алвеолярӣ ва дигар намунаҳо.
2. Нигоҳдорӣ ва интиқоли намунаҳо: Намунаҳоро метавон фавран барои санҷиш истифода бурд ё барои санҷиш дар ҳарорати -70℃ ё камтар нигоҳ дошт. Мӯҳлати нигоҳдорӣ 6 моҳ аст. Аз яхкунӣ ва обшавии такрорӣ худдорӣ бояд кард. Намунаҳо тавассути занҷири хунук интиқол дода мешаванд.
3. Талабот барои яхкунӣ ва обшавӣ: яхкунии зуд ва обшавӣ, аз яхкунӣ ва обшавии такрорӣ худдорӣ кунед.
Амалиёт
Пеш аз таҷриба, санҷед, ки оё маҳлул боришот дорад ва оё муҳраҳои магнитиро дубора овезон кардан мумкин аст.
1. 200~300 мкл намунаро ба найчаи сентрифугаи 1,5 мл интиқол диҳед, 600 мкл маҳлули лизис ва пайвасткунӣ, 20 мкл протеиназа К ва 20 мкл суспензияи магнитии муҳраҳоро пайдарпай илова кунед ва бо суръати баланд барои 30 сония гирд кунед. Дар ҳарорати 50°C барои 5~7 дақиқа инкубатсия кунед. Агар термостат функсияи ларзиш надошта бошад, дар давраи инкубатсия 3 маротиба, ҳар дафъа барои 15 сония, гирд кунед.
2. Барои ҷудо кардани магнитӣ ба тахтаи магнитии 1,5 мл то шаффоф ва шаффоф шудани маҳлул интиқол диҳед ва маҳлулро партоед.
3. 700 мкл буфери шустушӯй А илова кунед, барои 10 сония гирд кунед, то донаҳои магнитӣ пора шаванд ва сипас барои ҷудо кардани магнитӣ ба стенди магнитӣ то шаффоф шудани маҳлул интиқол диҳед ва маҳлулро партоед.
4. 700 мкл буфери шустушӯй B илова кунед, барои пора кардани муҳраҳои магнитӣ ба муддати 10 сония гирд кунед, барои ҷудо кардани магнитӣ ба стенди магнитӣ то шаффоф шудани маҳлул интиқол диҳед ва маҳлулро партоед.
5. Боз 700 мкл буфери шустушӯй B илова кунед, барои 10 сония гирд кунед, то донаҳои магнитӣ пора шаванд, то шаффоф шудани маҳлул ба стенди магнитӣ барои ҷудокунии магнитӣ интиқол диҳед ва маҳлулро партоед.
6. Барои ҷамъ кардани қатраҳо дар девори найча, ба таври кӯтоҳ сентрифуга кунед, барои равшан кардан ба стенди магнитӣ интиқол диҳед ва моеъи боқимондаро ҷаббида гиред. Дар ҳаво барои 3-5 дақиқа хушк кунед.
Эзоҳ: Боқимондаи этанол аксуламалҳои минбаъдаи ферментиро бозмедорад, аз ин рӯ, ҳангоми хушккунӣ боварӣ ҳосил кунед, ки этанол пурра бухор мешавад. Барои пешгирӣ аз таъсири элютсияи минбаъда, онро муддати тӯлонӣ хушк накунед.
7. 40~100 мкл маҳлули элютсионӣ илова кунед, бо суръати баланд барои 2~3 дақиқа гирд кунед, то муҳраҳои магнитӣ пора шаванд. Дар ҳарорати 60°C барои 5 дақиқа инкубатсия кунед, сипас бо суръати баланд барои 60 сония гирд кунед.
8. Барои ҷамъоварии моеъ аз сарпӯши найча ва интиқол додани он ба рафи магнитӣ фавран сентрифуга кунед, то он даме ки муҳраҳои магнитӣ пурра адсорбсия шаванд. Сипас, моеъро бодиққат ба найчаи нави сентрифуга гузаронед, то маҳлули кислотаи нуклеинро ба даст оред.
9. Маҳлули кислотаи нуклеинро барои нигоҳдории кӯтоҳмуддат дар ҳарорати -20°C ва барои нигоҳдории дарозмуддат -80°C нигоҳ доштан мумкин аст.
Эзоҳҳо
1. Буферҳои гуногуни ин маҷмӯа дорои намакҳои гуанидин мебошанд. Барои бехатарӣ ва саломатии худ, лутфан халати лабораторӣ ва дастпӯшакҳои якдафъаина пӯшед. Ва мувофиқи чораҳои бехатарии стандартӣ кор кунед. Нагузоред, ки буфер ба пӯст, чашм ва луобпардаҳо расад. Агар ин рӯй диҳад, лутфан фавран бо оби фаровон бишӯед ва ба духтур муроҷиат кунед.
2. Агар маҳлул таҳшин шавад, пеш аз истифода онро дар оби 30°C то пурра ҳал шудани таҳшин шустан лозим аст.
3. Агар овезонкунии муҳраҳои магнитӣ ях баста бошад, онро истифода набаред.
4. Буферҳои гуногуни ин маҷмӯа дорои намакҳои гуанидин мебошанд. Барои коркарди онҳо аз дезинфексияҳои оксидкунанда, ба монанди гипохлорити натрий, истифода набаред, вагарна газҳои заҳролуд хориҷ мешаванд ва онҳо бояд ҳамчун партовҳои тиббӣ коркард шаванд.
5. Ҳангоми элюсия метавонад донаҳои магнитии боқимонда боқӣ монанд. Ҳангоми гирифтани намунаҳо, кӯшиш кунед, ки аз нафаскашии донаҳои магнитӣ худдорӣ кунед.