ชุดตรวจ DNA/RNA ไวรัสแบบแม่เหล็กอเนกประสงค์ HYD521
ชุดสกัด DNA/RNA ไวรัสแบบแม่เหล็กอเนกประสงค์ เหมาะสำหรับการสกัดกรดนิวคลีอิกของไวรัสจากเลือดครบส่วนหรือของเหลวในร่างกายที่ปราศจากเซลล์ (เช่น ซีรัม พลาสมา น้ำไขสันหลัง สารคัดหลั่งจากโพรงจมูก/คอ น้ำล้างถุงลมปอด ฯลฯ) วิธีนี้ใช้เทคโนโลยีการทำให้บริสุทธิ์ด้วยลูกปัดแม่เหล็ก และไม่จำเป็นต้องใช้การสกัดด้วยฟีนอลหรือคลอโรฟอร์มที่เป็นพิษในระหว่างกระบวนการสกัด ปลอดภัย ไม่เป็นพิษ และรวดเร็ว ผลิตภัณฑ์ที่ได้สามารถนำไปใช้โดยตรงใน PCR, qPCR, การจัดลำดับรุ่นที่สอง และการทดลองอื่นๆ เมื่อใช้ร่วมกับเครื่องมือสกัดอัตโนมัติด้วยลูกปัดแม่เหล็ก จะสามารถสกัดกรดนิวคลีอิกได้ในปริมาณมาก
ข้อมูลผลิตภัณฑ์
| ส่วนประกอบ | 48T |
| สารละลายสำหรับการสลายและจับยึด | 33 มล. |
| ระบบแขวนลูกปัดแม่เหล็ก | 1.1 มล. |
| บัฟเฟอร์สำหรับล้าง A | 40 มล. |
| บัฟเฟอร์ล้าง B | 80 มล. |
| สารละลายชะล้าง | 10 มล. |
| โปรตีเนส เค | 1.1 มล. |
เงื่อนไขการจัดเก็บ
ควรเก็บเอนไซม์โปรตีเนส เค ไว้ที่อุณหภูมิ 2-8 องศาเซลเซียส ส่วนส่วนผสมอื่นๆ ควรเก็บไว้ที่อุณหภูมิห้อง อายุการเก็บรักษา 18 เดือน
คำอธิบายตัวอย่าง
1. ประเภทตัวอย่างที่ใช้ได้: เลือดครบส่วน, ซีรั่ม, พลาสมา, น้ำไขสันหลัง, สารคัดหลั่งจากโพรงจมูก/คอหอย, น้ำล้างถุงลมปอด และตัวอย่างอื่นๆ
2. การเก็บรักษาและการขนส่งตัวอย่าง: ตัวอย่างสามารถนำไปใช้ทดสอบได้ทันที หรือเก็บรักษาไว้ที่อุณหภูมิ -70℃ หรือต่ำกว่าเพื่อรอการทดสอบ ระยะเวลาการเก็บรักษาคือ 6 เดือน ควรหลีกเลี่ยงการแช่แข็งและละลายซ้ำหลายครั้ง ตัวอย่างจะถูกขนส่งโดยใช้ระบบควบคุมอุณหภูมิ (cold chain)
3. ข้อกำหนดเกี่ยวกับการแช่แข็งและการละลาย: ควรแช่แข็งและละลายอย่างรวดเร็ว หลีกเลี่ยงการแช่แข็งและละลายซ้ำหลายครั้ง
การดำเนินการ
ก่อนเริ่มการทดลอง ให้ตรวจสอบว่าสารละลายมีตะกอนหรือไม่ และลูกปัดแม่เหล็กสามารถแขวนลอยได้อีกครั้งหรือไม่
1. ถ่ายตัวอย่าง 200-300 ไมโครลิตรลงในหลอดเหวี่ยงขนาด 1.5 มิลลิลิตร เติมสารละลายสลายเซลล์และจับยึด 600 ไมโครลิตร โปรตีนเนส เค 20 ไมโครลิตร และสารแขวนลอยลูกปัดแม่เหล็ก 20 ไมโครลิตร ตามลำดับ แล้วเขย่าด้วยความเร็วสูงเป็นเวลา 30 วินาที บ่มที่อุณหภูมิ 50 องศาเซลเซียส เป็นเวลา 5-7 นาที หากเครื่องควบคุมอุณหภูมิไม่มีฟังก์ชันการเขย่า ให้เขย่า 3 ครั้งในระหว่างการบ่ม ครั้งละ 15 วินาที
2. เทสารละลายลงในภาชนะแม่เหล็กขนาด 1.5 มล. เพื่อแยกด้วยแม่เหล็กจนกว่าสารละลายจะใสและโปร่งแสง จากนั้นจึงทิ้งสารละลายส่วนนั้นไป
3. เติมบัฟเฟอร์ล้าง A จำนวน 700 ไมโครลิตร เขย่าด้วยเครื่องปั่นเหวี่ยงเป็นเวลา 10 วินาที เพื่อให้เม็ดแม่เหล็กแตกตัว จากนั้นย้ายไปวางบนแท่นแม่เหล็กเพื่อแยกด้วยแม่เหล็กจนกว่าสารละลายจะใส แล้วทิ้งสารละลายส่วนนั้นไป
4. เติมบัฟเฟอร์ล้าง B จำนวน 700 ไมโครลิตร เขย่าด้วยเครื่องปั่นเหวี่ยง (vortex) เป็นเวลา 10 วินาที เพื่อให้เม็ดแม่เหล็กแตกตัว จากนั้นย้ายไปวางบนแท่นแม่เหล็กเพื่อแยกด้วยแม่เหล็กจนกว่าสารละลายจะใส แล้วทิ้งสารละลายส่วนนั้นไป
5. เติมบัฟเฟอร์ล้าง B ปริมาณ 700 ไมโครลิตรลงไปอีกครั้ง เขย่าด้วยเครื่องปั่นเหวี่ยงเป็นเวลา 10 วินาที เพื่อให้เม็ดแม่เหล็กแตกตัว จากนั้นย้ายไปวางบนแท่นแม่เหล็กเพื่อแยกด้วยแม่เหล็กจนกว่าสารละลายจะใส แล้วทิ้งสารละลายส่วนนั้นไป
6. นำไปปั่นเหวี่ยงสักครู่เพื่อรวบรวมหยดของเหลวที่เกาะอยู่บนผนังหลอดทดลอง จากนั้นย้ายไปวางบนแท่นแม่เหล็กเพื่อทำให้ใส และดูดซับของเหลวส่วนเกินออก ผึ่งลมให้แห้งประมาณ 3-5 นาที
หมายเหตุ: สารตกค้างของเอทานอลจะยับยั้งปฏิกิริยาของเอนไซม์ในขั้นตอนต่อไป ดังนั้นโปรดตรวจสอบให้แน่ใจว่าเอทานอลระเหยออกไปหมดเมื่อทำการอบแห้ง อย่าอบแห้งนานเกินไปเพื่อหลีกเลี่ยงผลกระทบต่อกระบวนการชะล้างในขั้นตอนต่อไป
7. เติมสารละลาย Elution ปริมาณ 40-100 ไมโครลิตร เขย่าด้วยความเร็วสูงประมาณ 2-3 นาที เพื่อให้เม็ดแม่เหล็กแตกตัว บ่มที่อุณหภูมิ 60℃ เป็นเวลา 5 นาที จากนั้นเขย่าด้วยความเร็วสูงอีก 60 วินาที
8. ปั่นเหวี่ยงทันทีเพื่อแยกของเหลวออกจากฝาหลอดทดลอง แล้วถ่ายเทไปยังชั้นวางแม่เหล็กจนกระทั่งเม็ดแม่เหล็กถูกดูดซับจนหมด จากนั้นค่อยๆ ถ่ายเทของเหลวไปยังหลอดทดลองปั่นเหวี่ยงใหม่เพื่อให้ได้สารละลายกรดนิวคลีอิก
9. สารละลายกรดนิวคลีอิกสามารถเก็บรักษาได้ที่อุณหภูมิ -20°C สำหรับการเก็บรักษาในระยะสั้น และ -80°C สำหรับการเก็บรักษาในระยะยาว
หมายเหตุ
1. สารละลายบัฟเฟอร์ต่างๆ ในชุดนี้มีส่วนประกอบของเกลือกัวนิดีน เพื่อความปลอดภัยและสุขภาพของคุณ โปรดสวมเสื้อคลุมห้องปฏิบัติการและถุงมือแบบใช้แล้วทิ้ง และปฏิบัติตามข้อควรระวังตามมาตรฐานความปลอดภัย อย่าให้สารละลายบัฟเฟอร์สัมผัสกับผิวหนัง ดวงตา และเยื่อเมือก หากเกิดการสัมผัส ให้ล้างออกทันทีด้วยน้ำปริมาณมากและไปพบแพทย์
2. หากสารละลายเกิดการตกตะกอน จะต้องนำไปแช่ในน้ำอุณหภูมิ 30 องศาเซลเซียสจนกว่าตะกอนจะละลายหมดก่อนนำไปใช้
3. หากลูกปัดแม่เหล็กที่ใช้แขวนลอยแข็งตัว ห้ามใช้งาน
4. สารละลายบัฟเฟอร์ต่างๆ ในชุดนี้ประกอบด้วยเกลือกัวนิดีน ห้ามใช้สารฆ่าเชื้อที่มีฤทธิ์ออกซิไดซ์ เช่น โซเดียมไฮโปคลอไรต์ ในการบำบัด เพราะจะทำให้เกิดก๊าซพิษและต้องนำไปกำจัดเป็นขยะทางการแพทย์
5. อาจมีอนุภาคแม่เหล็กตกค้างอยู่ระหว่างกระบวนการชะล้าง ควรหลีกเลี่ยงการสูดดมอนุภาคแม่เหล็กขณะดูดตัวอย่าง


