2× PCR Premiksi (Boyalı) HYA442
2× PCR Master Mix, Taq DNA Polimeraz, dNTP'ler ve PCR için gerekli diğer bileşenleri içerir. Master Mix, özel stabilizatörlerimizle 4℃'de 3 ay boyunca stabildir. Ön karışım çözeltisi, geleneksel PCR için optimize edilmiştir ve DNA kalıbı ve primerler eklenerek kullanıma hazırdır. PCR ürünleri, önceden yüklenmiş bromofenol mavisi boyası ile doğrudan elektroforez için yüklenebilir. Amplifiye edilmiş ürünler 3'-dA çıkıntısı içerir ve kolayca T vektörüne klonlanabilir. 2× PCR Master Mix, PCR prosedürünü basitleştirir ve kontaminasyonu azaltır.
Bileşenler
| Bileşenler | Boyut-1 | Boyut-2 | Boyut-3 |
| 2× PCR Ön Karışımı (Boya İçeren) | 5mL | 1 mL × 15 | 1 mL × 50 |
Depolamak
-20°C'de 2 yıl saklayın.
Talimatlar
1. Reaksiyon Sistemi
| Bileşenler | Hacim |
| 2× PCR Ön Karışımı (Boya İçeren) | 25 µL |
| İleri Primer (10 μM) | 2 µL |
| Ters Primer (10 μM) | 2 µL |
| DNA Şablonu* | Değişken |
| ddH2O | 50 µL'ye kadar |
*Şablon kullanımı: 50-200 ng genomik DNA; 0.1-10 ng plazmit DNA
2. Tepki Programı
| Adım | Sıcaklık | Zaman | Döngüler |
| İlk Denatürasyon | 94 ℃ | 5 dakika | 1 |
| Denatürasyon | 94 ℃ | 30 saniye | 35 |
| Tavlama | 50-60 ℃ | 30 saniye | |
| Eklenti | 72 ℃ | 30-60 sn/kb | |
| Son Uzatma | 72 ℃ | 10 dakika | 1 |
| Tutmak | 4 ℃ | - | 1 |
1. Mg2+ Konsantrasyon: Bu ürün 3 mM MgCl içerir.2Çoğu PCR reaksiyonu için uygundur.
2. Tavlama sıcaklığı: Lütfen astarların teorik Tm değerine bakın. Tavlama sıcaklığı, astarın teorik değerinden 2-5℃ daha düşük ayarlanabilir.
3. Uzatma süresi: Moleküler tanımlama için 30 saniye/kb önerilir. Gen klonlama için 60 saniye/kb önerilir.
Notlar
1. 2× PCR Master Mix ile elde edilen PCR ürünleri poliakrilamid jel elektroforezi için uygun değildir.
2. Güvenliğiniz ve sağlığınız için lütfen işlem sırasında laboratuvar önlüğü ve tek kullanımlık eldiven giyiniz.
3. Bu yalnızca araştırma amaçlı kullanım içindir!