Manyetik Evrensel Viral DNA/RNA Kiti HYD521
Manyetik Evrensel Viral DNA/RNA Kiti, tam kandan veya hücre içermeyen vücut sıvılarından (serum, plazma, beyin omurilik sıvısı, burun/boğaz sürüntüsü, alveoler lavaj sıvısı vb.) viral nükleik asit elde etmek için uygundur. Bu yöntem, manyetik boncuk arıtma teknolojisini kullanır ve ekstraksiyon işlemi sırasında toksik fenol kloroform ekstraksiyonuna gerek duyulmaz. Güvenli, toksik olmayan ve hızlıdır. Elde edilen ürün doğrudan PCR, qPCR, ikinci nesil sekanslama ve diğer deneylerde kullanılabilir. Manyetik boncuklu otomatik ekstraksiyon cihazlarıyla birlikte kullanıldığında, nükleik asitlerin yüksek verimli ekstraksiyonu sağlanabilir.
Ürün bilgileri
| Bileşenler | 48T |
| Lizis ve Bağlama Çözümü | 33 mL |
| Manyetik boncuk süspansiyonu | 1,1 mL |
| Yıkama tamponu A | 40 mL |
| Yıkama tamponu B | 80 mL |
| Elüsyon çözeltisi | 10 mL |
| Proteinaz K | 1,1 mL |
Saklama Koşulları
Proteinaz K 2-8°C'de, diğer bileşenler ise oda sıcaklığında saklanmalıdır. Raf ömrü 18 aydır.
Örnek Açıklama
1. Uygulanabilir numune türleri: tam kan, serum, plazma, beyin omurilik sıvısı, burun/boğaz sürüntüleri, alveoler lavaj sıvısı ve diğer numuneler.
2. Numunelerin saklanması ve taşınması: Numuneler test için hemen kullanılabilir veya test için -70℃ veya daha düşük sıcaklıkta saklanabilir. Saklama süresi 6 aydır. Tekrarlanan dondurma ve çözme işlemlerinden kaçınılmalıdır. Numuneler soğuk zincir ile taşınır.
3. Donma-çözülme gereksinimleri: Hızlı dondurma ve çözme, tekrarlanan dondurma ve çözme işlemlerinden kaçının.
Operasyon
Deneyden önce, çözeltide çökelme olup olmadığını ve manyetik boncukların tekrar süspansiyon haline getirilip getirilemeyeceğini kontrol edin.
1. 200~300 μL numuneyi 1,5 mL'lik santrifüj tüpüne aktarın, sırasıyla 600 μL Lizis ve Bağlama Çözeltisi, 20 μL Proteinaz K ve 20 μL manyetik boncuk süspansiyonu ekleyin ve 30 saniye boyunca yüksek hızda vorteksleyin. 50℃'de 5~7 dakika inkübe edin. Termostatın salınım fonksiyonu yoksa, inkübasyon süresi boyunca her seferinde 15 saniye olmak üzere 3 kez vorteksleyin.
2. Çözelti berrak ve şeffaf hale gelene kadar manyetik ayırma işlemi için 1,5 mL'lik manyetik bir standa aktarın ve çözeltiyi atın.
3. 700 μL yıkama tamponu A ekleyin, manyetik boncukları parçalamak için 10 saniye boyunca vorteksleyin ve ardından çözelti berraklaşana kadar manyetik ayırma için manyetik bir standa aktarın ve çözeltiyi atın.
4. 700 μL yıkama tamponu B ekleyin, manyetik boncukları parçalamak için 10 saniye boyunca vorteksleyin, çözelti berraklaşana kadar manyetik ayırma için manyetik bir standa aktarın ve çözeltiyi atın.
5. Tekrar 700 μL yıkama tamponu B ekleyin, manyetik boncukları parçalamak için 10 saniye boyunca vorteksleyin, çözelti berraklaşana kadar manyetik ayırma için manyetik bir standa aktarın ve çözeltiyi atın.
6. Tüp duvarındaki damlacıkları toplamak için kısa süre santrifüjleyin, berraklaştırmak için manyetik bir standa aktarın ve kalan sıvıyı emdirin. 3-5 dakika havada kurutun.
Not: Etanol kalıntısı sonraki enzim reaksiyonlarını engelleyecektir, bu nedenle kurutma sırasında etanolün tamamen buharlaştığından emin olun. Sonraki elüsyon etkisini etkilememek için çok uzun süre kurutmayın.
7. 40~100 μL elüsyon çözeltisi ekleyin, manyetik boncukları parçalamak için 2~3 dakika yüksek hızda vorteksleyin. 60℃'de 5 dakika bekletin, ardından 60 saniye yüksek hızda vorteksleyin.
8. Tüp kapağındaki sıvıyı toplamak ve manyetik boncuklar tamamen emilene kadar manyetik rafa aktarmak için anlık santrifüj uygulayın. Ardından, nükleik asit çözeltisini elde etmek için sıvıyı dikkatlice yeni bir santrifüj tüpüne aktarın.
9. Nükleik asit çözeltisi kısa süreli saklama için -20°C'de, uzun süreli saklama için ise -80°C'de saklanabilir.
Notlar
1. Bu setteki çeşitli tampon çözeltiler guanidin tuzları içermektedir. Güvenliğiniz ve sağlığınız için lütfen laboratuvar önlüğü ve tek kullanımlık eldiven giyin. Ve güvenlik standartlarına uygun önlemler alarak kullanın. Tampon çözeltinin cilt, göz ve mukoza zarlarıyla temas etmesine izin vermeyin. Temas halinde derhal bol su ile yıkayın ve tıbbi yardım alın.
2. Çözelti çökelirse, kullanmadan önce çökelti tamamen çözünene kadar 30℃'lik suda bekletilmelidir.
3. Manyetik boncuk süspansiyonu donmuşsa, kullanmayın.
4. Bu setteki çeşitli tampon çözeltiler guanidin tuzları içermektedir. Bunları temizlemek için sodyum hipoklorit gibi oksitleyici dezenfektanlar kullanmayın, aksi takdirde zehirli gazlar açığa çıkar ve tıbbi atık olarak işlem görmeleri gerekir.
5. Elüsyon sırasında manyetik boncuk kalıntıları olabilir. Numuneleri aspire ederken manyetik boncukları solumaktan kaçınmaya çalışın.