Магнитлы универсаль вируслы ДНК/РНК җыелмасы HYD521
Магнитлы универсаль вируслы ДНК/РНК комплекты канның тулы яки күзәнәксез тән сыекчаларыннан (мәсәлән, сыворотка, плазма, баш мие сыекчасы, борын/тамак тампоннары, альвеоляр лаваж сыекчасы һ.б.) вируслы нуклеин кислотасын аерып алу өчен яраклы. Бу ысул магнитлы бүрекләрне чистарту технологиясен куллана, һәм экстракция процессында агулы фенол хлороформ экстракциясе кирәк түгел. Ул куркынычсыз, агулы түгел һәм тиз. Алынган продуктны турыдан-туры ПЦР, qPCR, икенче буын секвенирлау һәм башка экспериментларда кулланырга мөмкин. Магнитлы бүрекләр белән автоматик экстракция кораллары белән кулланылганда, нуклеин кислоталарын югары җитештерүчәнлектә экстракцияләүгә ирешергә мөмкин.
Продукция турында мәгълүмат
| Компонентлар | 48T |
| Лизис һәм бәйләү эремәсе | 33 мл |
| Магнитлы шарчыклы асма | 1,1 мл |
| Юу буферы A | 40 мл |
| Юу өчен буфер B | 80 мл |
| Элюция эремәсе | 10 мл |
| Протеиназа К | 1,1 мл |
Саклау шартлары
Протеиназа К 2-8°C температурада, ә башка ингредиентлар бүлмә температурасында сакланырга тиеш. Саклау вакыты - 18 ай.
Үрнәк тасвирламасы
1. Кулланыла торган үрнәк төрләре: тулы кан, сыворотка, плазма, баш мие сыекчасы, борын/тамак тампоннары, альвеоляр лаваж сыекчасы һәм башка үрнәкләр.
2. Үрнәкләрне саклау һәм ташу: Үрнәкләрне шунда ук сынау өчен кулланырга яки -70℃ яки аннан да түбәнрәк температурада сакларга мөмкин. Саклау вакыты - 6 ай. Кабат туңдырудан һәм эретүдән сакланырга кирәк. Үрнәкләр салкын чылбыр ярдәмендә ташыла.
3. Туңдыру-эретү таләпләре: Тиз туңдыру һәм эретү, кабат-кабат туңдырудан һәм эретүдән сакланыгыз.
Операция
Тәҗрибә алдыннан, эремәдә утырма барлыгын һәм магнит шарчыкларын яңадан элеп буламы-юкмы икәнен тикшерегез.
1. 200-300 мкл үрнәкне 1,5 мл центрифуга пробиркасына күчерегез, 600 мкл лизис һәм бәйләү эремәсен, 20 мкл протеиназа К һәм 20 мкл магнит шарчык суспензиясен бер-бер артлы өстәгез һәм югары тизлектә 30 секунд дәвамында әйләндерегез. 50°C температурада 5-7 минут инкубацияләгез. Әгәр термостатның тирбәнеш функциясе булмаса, инкубация чорында 3 тапкыр әйләндерегез, һәр тапкыр 15 секунд дәвамында.
2. Эремә үтә күренмәле булганчы, аны 1,5 мл магнитлы стендка магнит аеру өчен күчерегез һәм эремәне ташлагыз.
3. 700 мкл югыч буфер А өстәгез, магнит бөртекләрен ваклау өчен 10 секунд вортекслагыз, аннары эремә үтә күренмәле булганчы магнит аеру өчен магнит стендка күчерегез һәм эремәне ташлагыз.
4. 700 мкл югыч буфер B өстәгез, магнит бөртекләрен ваклау өчен 10 секунд вортекслагыз, эремә үтә күренмәле булганчы магнит аеру өчен магнит стендка күчерегез һәм эремәне ташлагыз.
5. Яңадан 700 мкл югыч буфер B өстәгез, магнит бөртекләрен ваклау өчен 10 секунд вортекслагыз, эремә үтә күренмәле булганчы магнит аеру өчен магнит стендка күчерегез һәм эремәне ташлагыз.
6. Труба стенасындагы тамчыларны җыю өчен кыска вакытка центрифугалагыз, ачыклау өчен магнитлы стендка күчерегез һәм калган сыеклыкны сеңдерегез. 3-5 минут һавада киптерегез.
Искәрмә: Этанол калдыгы аннан соңгы фермент реакцияләрен тоткарлаячак, шуңа күрә киптергәндә этанолның тулысынча парга әйләнүенә инаныгыз. Электрлауның аннан соңгы эффектына тәэсир итмәс өчен, бик озак киптермәгез.
7. 40~100 мкл Элюция эремәсе өстәгез, магнит шарчыкларын вату өчен югары тизлектә 2~3 минут әйләндерегез. 60°C температурада 5 минут инкубацияләгез, аннары югары тизлектә 60 секунд әйләндерегез.
8. Труба капкачыннан сыеклыкны җыеп, магнит түгәрәкләренә тулысынча адсорбцияләнгәнче күчерү өчен тиз арада центрифугалагыз. Аннары нуклеин кислотасы эремәсен алу өчен сыеклыкны яңа центрифуга трубкасына сак кына күчерегез.
9. Нуклеин кислотасы эремәсен кыска вакытлы саклау өчен -20°C һәм озак вакытлы саклау өчен -80°C температурада сакларга мөмкин.
Искәрмәләр
1. Бу комплекттагы төрле буферлар гуанидин тозларын үз эченә ала. Иминлегегез һәм сәламәтлегегез өчен, зинһар, лаборатория халаты һәм бер тапкыр кулланыла торган перчаткалар киегез. Һәм куркынычсызлык стандартларына туры китереп эшләгез. Буферның тирегә, күзләргә һәм лайлалы тышчаларга тиюенә юл куймагыз. Әгәр дә бу хәл килеп чыкса, зинһар, шунда ук күп күләмдә су белән юыгыз һәм медицина ярдәменә мөрәҗәгать итегез.
2. Әгәр эремә утырмага эләксә, куллану алдыннан утырма тулысынча эрегәнче, аны 30°C суда юарга кирәк.
3. Әгәр магнитлы шарчык суспензиясе туңган булса, аны кулланмагыз.
4. Бу комплекттагы төрле буферлар гуанидин тозларын үз эченә ала. Аларны эшкәртү өчен натрий гипохлориты кебек оксидлаштыручы дезинфекцияләүче матдәләр кулланмагыз, югыйсә агулы газлар бүленеп чыгачак һәм аларны медицина калдыклары буларак эшкәртергә кирәк.
5. Элюция вакытында магнит бөртекләре калырга мөмкин. Үрнәкләрне сулаганда магнит бөртекләрен суларга тырышмагыз.