Магнітний універсальний набір для визначення вірусної ДНК/РНК HYD521
Універсальний магнітний набір для визначення вірусної ДНК/РНК підходить для екстракції вірусної нуклеїнової кислоти з цільної крові або безклітинних рідин організму (таких як сироватка, плазма, спинномозкова рідина, мазки з носа/глотки, рідина для альвеолярного лаважу тощо). Цей метод використовує технологію очищення магнітними кульками, і під час процесу екстракції не потрібна екстракція токсичним фенолом-хлороформом. Він безпечний, нетоксичний та швидкий. Отриманий продукт можна безпосередньо використовувати в ПЛР, кПЛР, секвенуванні другого покоління та інших експериментах. При використанні з автоматизованими приладами для екстракції з магнітними кульками можна досягти високопродуктивної екстракції нуклеїнових кислот.
Інформація про продукт
| Компоненти | 48Т |
| Розчин для лізису та зв'язування | 33 мл |
| Магнітна підвіска з кульок | 1,1 мл |
| Промивний буфер А | 40 мл |
| Промивний буфер B | 80 мл |
| Розчин для елюювання | 10 мл |
| Протеїназа К | 1,1 мл |
Умови зберігання
Протеїназу К слід зберігати при температурі 2~8℃, а інші інгредієнти – при кімнатній температурі. Термін придатності становить 18 місяців.
Зразок опису
1. Застосовувані типи зразків: цільна кров, сироватка, плазма, спинномозкова рідина, мазки з носа/глотки, рідина альвеолярного лаважу та інші зразки.
2. Зберігання та транспортування зразків: Зразки можна використовувати для тестування негайно або зберігати при температурі -70℃ або нижче. Термін зберігання становить 6 місяців. Слід уникати повторного заморожування та розморожування. Зразки транспортуються холодовим ланцюгом.
3. Вимоги до заморожування-розморожування: швидке заморожування та розморожування, уникайте повторного заморожування та розморожування.
Операція
Перед експериментом перевірте, чи у розчині випав осад і чи можна ресуспендувати магнітні кульки.
1. Перенесіть 200~300 мкл зразка в центрифужну пробірку об'ємом 1,5 мл, додайте послідовно 600 мкл розчину для лізису та зв'язування, 20 мкл протеїнази К та 20 мкл суспензії магнітних кульок і перемішуйте на високій швидкості протягом 30 секунд. Інкубуйте при 50℃ протягом 5~7 хвилин. Якщо термостат не має функції коливань, перемішуйте на вортексі 3 рази протягом інкубаційного періоду, кожен раз по 15 секунд.
2. Перенесіть на магнітний штатив об'ємом 1,5 мл для магнітного розділення, доки розчин не стане прозорим та прозорим, після чого викиньте розчин.
3. Додайте 700 мкл промивного буфера А, перемішайте на вортексі протягом 10 секунд, щоб розбити магнітні кульки, а потім перенесіть на магнітний штатив для магнітного розділення, доки розчин не стане прозорим, та викиньте розчин.
4. Додайте 700 мкл промивного буфера B, перемішайте на вортексі протягом 10 секунд, щоб розбити магнітні кульки, перенесіть на магнітний штатив для магнітного розділення, доки розчин не стане прозорим, та викиньте розчин.
5. Знову додайте 700 мкл промивного буфера B, перемішайте на вортексі протягом 10 секунд, щоб розбити магнітні кульки, перенесіть на магнітний штатив для магнітного розділення, доки розчин не стане прозорим, та викиньте розчин.
6. Короткочасно центрифугуйте, щоб зібрати краплі на стінці пробірки, перенесіть на магнітний штатив для освітлення та поглиніть залишкову рідину. Висушіть на повітрі протягом 3-5 хвилин.
Примітка: Залишки етанолу пригнічуватимуть наступні ферментативні реакції, тому переконайтеся, що етанол повністю випаровується під час сушіння. Не сушіть надто довго, щоб не вплинути на подальший ефект елюювання.
7. Додайте 40~100 мкл розчину для елюції, перемішуйте на вортексі на високій швидкості протягом 2~3 хвилин, щоб розбити магнітні кульки. Інкубуйте при 60℃ протягом 5 хвилин, потім перемішуйте на вортексі на високій швидкості протягом 60 секунд.
8. Миттєво відігрійте в центрифугу, щоб зібрати рідину з кришки пробірки та перенести її на магнітний штатив до повної адсорбції магнітних кульок. Потім обережно перенесіть рідину в нову центрифужну пробірку, щоб отримати розчин нуклеїнової кислоти.
9. Розчин нуклеїнової кислоти можна зберігати при температурі -20°C для короткочасного зберігання та -80°C для тривалого зберігання.
Нотатки
1. Різні буфери в цьому наборі містять солі гуанідину. Для вашої безпеки та здоров'я, будь ласка, одягайте лабораторний халат та одноразові рукавички. І поводьтеся відповідно до запобіжних заходів безпеки. Не допускайте потрапляння буфера на шкіру, в очі та слизові оболонки. Якщо це все ж таки сталося, негайно промийте їх великою кількістю води та зверніться за медичною допомогою.
2. Якщо розчин випадає в осад, його потрібно перед використанням промити водою з температурою 30℃ до повного розчинення осаду.
3. Якщо суспензія магнітних кульок заморожена, не використовуйте її.
4. Різні буфери в цьому наборі містять солі гуанідину. Не використовуйте для їх обробки окислювальні дезінфікуючі засоби, такі як гіпохлорит натрію, інакше виділятимуться токсичні гази, і їх необхідно утилізувати як медичні відходи.
5. Під час елюції можуть залишатися залишкові магнітні кульки. Намагайтеся уникати вдихання магнітних кульок під час аспірації зразків.