مقناطیسی یونیورسل وائرل DNA/RNA کٹ HYD521

پروڈکٹ کی معلومات

ذخیرہ کرنے کی شرائط

Proteinase K کو 2~8℃ پر ذخیرہ کیا جانا چاہیے اور دیگر اجزاء کو کمرے کے درجہ حرارت پر ذخیرہ کیا جانا چاہیے۔ شیلف زندگی 18 ماہ ہے.

نمونہ کی تفصیل

1. قابل اطلاق نمونہ کی قسمیں: سارا خون، سیرم، پلازما، دماغی اسپائنل فلوئڈ، ناک/فرینجیل سویبز، الیوولر لیویج فلوئڈ اور دیگر نمونے۔

2. نمونوں کا ذخیرہ اور نقل و حمل: نمونوں کو فوری طور پر جانچ کے لیے استعمال کیا جا سکتا ہے یا جانچ کے لیے -70℃ یا اس سے کم پر ذخیرہ کیا جا سکتا ہے۔ ذخیرہ کرنے کی مدت 6 ماہ ہے۔ بار بار جمنے اور پگھلنے سے گریز کرنا چاہیے۔ نمونوں کو کولڈ چین کے ذریعے منتقل کیا جاتا ہے۔

3. منجمد پگھلنے کے تقاضے: فوری منجمد اور پگھلنے، بار بار جمنے اور پگھلنے سے گریز کریں۔

آپریشن

تجربہ کرنے سے پہلے، چیک کریں کہ آیا محلول میں ورن ہے اور آیا مقناطیسی موتیوں کو دوبارہ معطل کیا جا سکتا ہے۔

1. 200~300 μL نمونے کو 1.5 ملی لیٹر سینٹری فیوج ٹیوب میں منتقل کریں، 600 μL Lysis اور بائنڈنگ سلوشن، 20 μL Proteinase K، اور 20 μL مقناطیسی مالا سسپنشن ترتیب میں شامل کریں، اور 30 ​​سیکنڈ کے لیے تیز رفتاری سے بھنور۔ 50℃ پر 5~7 منٹ تک انکیوبیٹ کریں۔ اگر تھرموسٹیٹ میں دوغلی فعل نہیں ہے تو انکیوبیشن کے دوران 3 بار بھنور، ہر بار 15 سیکنڈ کے لیے۔

2. مقناطیسی علیحدگی کے لیے 1.5 ملی لیٹر مقناطیسی اسٹینڈ پر منتقل کریں جب تک کہ محلول صاف اور شفاف نہ ہو، اور محلول کو ضائع کر دیں۔

3. 700 μL واش بفر A شامل کریں، مقناطیسی موتیوں کو توڑنے کے لیے 10 سیکنڈ کے لیے ورٹیکس کریں، اور پھر محلول صاف ہونے تک مقناطیسی علیحدگی کے لیے مقناطیسی اسٹینڈ پر منتقل کریں، اور محلول کو ضائع کر دیں۔

4. 700 μL واش بفر B شامل کریں، مقناطیسی موتیوں کو توڑنے کے لیے 10 سیکنڈ کے لیے ورٹیکس کریں، محلول صاف ہونے تک مقناطیسی علیحدگی کے لیے مقناطیسی اسٹینڈ میں منتقل کریں، اور محلول کو ضائع کر دیں۔

5. دوبارہ 700 μL واش بفر B شامل کریں، مقناطیسی موتیوں کو توڑنے کے لیے 10 سیکنڈ کے لیے بھنور، محلول صاف ہونے تک مقناطیسی علیحدگی کے لیے مقناطیسی اسٹینڈ میں منتقل کریں، اور محلول کو ضائع کر دیں۔

6. ٹیوب کی دیوار پر بوندوں کو جمع کرنے کے لیے مختصر طور پر سینٹرفیوج کریں، وضاحت کے لیے مقناطیسی اسٹینڈ میں منتقل کریں، اور بقایا مائع کو جذب کریں۔ 3-5 منٹ کے لیے ہوا میں خشک کریں۔

نوٹ: ایتھنول کی باقیات بعد میں ہونے والے انزائم کے رد عمل کو روکیں گی، اس لیے اس بات کو یقینی بنائیں کہ خشک ہونے پر ایتھنول مکمل طور پر بخارات بن جائے۔ بعد کے اخراج کے اثر کو متاثر کرنے سے بچنے کے لیے زیادہ دیر تک خشک نہ کریں۔

7. مقناطیسی موتیوں کو توڑنے کے لیے 40~100 μL Elution محلول شامل کریں، 2~3 منٹ کے لیے تیز رفتاری سے بھنور۔ 5 منٹ کے لیے 60 ℃ پر انکیوبیٹ کریں، پھر 60 سیکنڈ کے لیے تیز رفتاری سے بھنور لگائیں۔

8. ٹیوب کیپ سے مائع جمع کرنے اور مقناطیسی موتیوں کے مکمل جذب ہونے تک اسے مقناطیسی ریک میں منتقل کرنے کے لیے فوری سینٹری فیوج۔ پھر نیوکلک ایسڈ محلول حاصل کرنے کے لیے مائع کو احتیاط سے ایک نئی سینٹری فیوج ٹیوب میں منتقل کریں۔

9. نیوکلیک ایسڈ محلول کو قلیل مدتی اسٹوریج کے لیے -20°C اور طویل مدتی اسٹوریج کے لیے -80°C پر ذخیرہ کیا جا سکتا ہے۔

نوٹس

1. اس کٹ کے مختلف بفروں میں guanidine نمکیات ہوتے ہیں۔ اپنی حفاظت اور صحت کے لیے، براہ کرم لیب کوٹ اور ڈسپوزایبل دستانے پہنیں۔ اور حفاظتی معیاری احتیاطی تدابیر کے مطابق ہینڈل کریں۔ بفر کو جلد، آنکھوں اور چپچپا جھلیوں کے ساتھ رابطے میں نہ آنے دیں۔ اگر ایسا ہوتا ہے تو، براہ کرم کافی مقدار میں پانی سے فوری طور پر دھوئیں اور طبی امداد حاصل کریں۔

2. اگر محلول تیز ہوجاتا ہے، تو اسے 30℃ پانی میں نہانے کی ضرورت ہے جب تک کہ استعمال سے پہلے ورن مکمل طور پر تحلیل نہ ہوجائے۔

3. اگر مقناطیسی مالا سسپنشن منجمد ہو تو اسے استعمال نہ کریں۔

4. اس کٹ کے مختلف بفروں میں guanidine نمکیات ہوتے ہیں۔ ان کے علاج کے لیے آکسیڈائزنگ جراثیم کش ادویات جیسے سوڈیم ہائپوکلورائٹ کا استعمال نہ کریں، بصورت دیگر زہریلی گیسیں خارج ہوں گی اور انہیں طبی فضلے کے طور پر علاج کرنا چاہیے۔

5. اخراج کے دوران بقایا مقناطیسی موتیوں کی مالا ہو سکتی ہے۔ نمونوں کی خواہش کرتے وقت مقناطیسی موتیوں کو سانس لینے سے بچنے کی کوشش کریں۔