Bộ kit PCR pha sẵn 2× (có chất nhuộm) HYA442
Bộ kit PCR Master Mix 2× chứa Taq DNA Polymerase, dNTPs và các thành phần cần thiết khác cho phản ứng PCR. Bộ kit này ổn định trong 3 tháng ở 4℃ nhờ chất ổn định được chúng tôi tùy chỉnh. Dung dịch trộn sẵn được tối ưu hóa cho phản ứng PCR thông thường và sẵn sàng sử dụng bằng cách thêm khuôn DNA và mồi. Sản phẩm PCR có thể được nạp trực tiếp để điện di với thuốc nhuộm bromophenol blue đã được nạp sẵn. Sản phẩm khuếch đại chứa phần nhô ra 3'-dA và có thể dễ dàng được nhân bản vào vector T. Bộ kit PCR Master Mix 2× đơn giản hóa quy trình PCR và giảm thiểu ô nhiễm.
Các thành phần
| Các thành phần | Kích cỡ-1 | Kích cỡ 2 | Kích cỡ-3 |
| Bộ kit PCR pha sẵn 2× (có chất nhuộm) | 5mL | 1 mL×15 | 1 mL × 50 |
Kho
Bảo quản ở -20°C trong 2 năm.
Hướng dẫn
1. Hệ thống phản ứng
| Các thành phần | Âm lượng |
| Bộ kit PCR pha sẵn 2× (có chất nhuộm) | 25 uL |
| Mồi xuôi (10 μM) | 2 µL |
| Mồi ngược (10 μM) | 2 µL |
| Khuôn mẫu DNA* | Biến |
| ddH2CÁI | Tối đa 50 µL |
*Sử dụng mẫu: DNA bộ gen 50-200 ng; DNA plasmid 0,1-10 ng
2. Chương trình phản ứng
| Bước chân | Nhiệt độ | Thời gian | Chu kỳ |
| Sự biến tính ban đầu | 94 ℃ | 5 phút | 1 |
| Biến tính | 94 ℃ | 30 giây | 35 |
| Ủ nhiệt | 50-60 ℃ | 30 giây | |
| Sự mở rộng | 72 ℃ | 30-60 giây/kb | |
| Gia hạn cuối cùng | 72 ℃ | 10 phút | 1 |
| Giữ | 4 ℃ | - | 1 |
1. Mg2+ Nồng độ: Sản phẩm này chứa 3 mM MgCl2Thích hợp cho hầu hết các phản ứng PCR.
2. Nhiệt độ ủ: Vui lòng tham khảo giá trị Tm lý thuyết của mồi. Nhiệt độ ủ có thể được đặt thấp hơn 2-5℃ so với giá trị lý thuyết của mồi.
3. Thời gian kéo dài: Đối với nhận dạng phân tử, nên dùng 30 giây/kb. Đối với nhân bản gen, nên dùng 60 giây/kb.
Ghi chú
1. Sản phẩm PCR sử dụng hỗn hợp PCR Master Mix 2× không thích hợp cho điện di trên gel polyacrylamide.
2. Vì sự an toàn và sức khỏe của bạn, vui lòng mặc áo khoác phòng thí nghiệm và đeo găng tay dùng một lần trong quá trình thao tác.
3. Chỉ được sử dụng cho mục đích nghiên cứu!