2× PCR פּרעמיקס (מיט פאַרב) HYA442
2× PCR מאַסטער מיקס כּולל טאַק דנאַ פּאָלימעראַזע, dNTPs, און אַנדערע PCR-נייטיקע קאָמפּאָנענטן. די מאַסטער מיקס איז סטאַביל פֿאַר 3 חדשים ביי 4℃ מיט אונדזערע קאַסטאַמייזד סטאַביליזאַטאָרן. די פאַר-מיקס לייזונג איז אָפּטימיזירט פֿאַר קאַנווענשאַנאַל PCR און גרייט צו נוצן דורך צולייגן דנאַ טעמפּלאַט און פּריימערס. די PCR פּראָדוקטן קענען זיין לאָודיד גלייך פֿאַר עלעקטראָפאָרעזיס מיט פאַר-לאָודיד בראָמאָפענאָל בלוי פאַרב. די אַמפּליפייד פּראָדוקטן כּולל 3'-dA פּראָטרוזשאַן און קענען לייכט זיין קלאָנירט אין T וועקטאָר. די 2× PCR מאַסטער מיקס סימפּליפייז PCR פּראָצעדור און ראַדוסאַז קאַנטאַמאַניישאַן.
קאָמפּאָנענטן
| קאָמפּאָנענטן | גרייס-1 | גרייס-2 | גרייס-3 |
| 2× PCR פּרעמיקס (מיט פאַרב) | 5 מל | 1 מל × 15 | 1 מל × 50 |
סטאָרידזש
האַלטן ביי -20°C פֿאַר 2 יאָר.
אינסטרוקציעס
1. רעאַקציע סיסטעם
| קאָמפּאָנענטן | באַנד |
| 2× PCR פּרעמיקס (מיט פאַרב) | 25 µL |
| פאָרווערטס פּריימער (10 מיקראָמעטער) | 2 µL |
| פאַרקערט פּריימער (10 מיקראָמעטער) | 2 µL |
| דנאַ מוסטער* | וועריאַבלע |
| דדה2די | ביז 50 µL |
* מוסטער באַניץ: 50-200 נג גענאָמיק דנאַ; 0.1-10 נג פּלאַזמיד דנאַ
2. רעאַקציע פּראָגראַם
| שריט | טעמפּעראַטור | צייט | ציקלען |
| ערשטע דענאטוראציע | 94 ℃ | 5 מינוט | 1 |
| דענאטוראציע | 94 ℃ | 30 סעקונדעס | 35 |
| אויסגליטשן | 50-60 ℃ | 30 סעקונדעס | |
| עקסטענשאַן | 72 ℃ | 30-60 סעק/קילאָביט | |
| לעצטע פארלענגערונג | 72 ℃ | 10 מינוט | 1 |
| האַלטן | 4 ℃ | - | 1 |
1. מג2+ קאָנצענטראַציע: דאָס פּראָדוקט כּולל 3 mM פון MgCl2, פּאַסיק פֿאַר רובֿ PCR רעאַקציעס.
2. אויסגליטשן טעמפּעראַטור: ביטע באַציט זיך צו דער טעאָרעטישער Tm ווערט פון פּריימערס. די אויסגליטשן טעמפּעראַטור קען זיין געשטעלט צו 2-5 ℃ נידעריקער ווי דער טעאָרעטישער ווערט פון דעם פּריימער.
3. פארלענגערונג צייט: פאר מאלעקולארער אידענטיפיקאציע, ווערט רעקאמענדירט 30 סעק/קילאביט. פאר גען קלאנירונג, ווערט רעקאמענדירט 60 סעק/קילאביט.
נאטיצן
1. PCR פּראָדוקטן מיט 2× PCR מאַסטער מיקס זענען נישט פּאַסיק פֿאַר פּאָליאַקרילאַמיד געל עלעקטראָפאָרעזיס.
2. פֿאַר אייער זיכערקייט און געזונט, ביטע טראָגט לאַבאָראַטאָריע מאַנטלען און איין-מאָל-ניצלעכע הענטשקעס פֿאַר דער אָפּעראַציע.
3. עס ווערט גענוצט נאר פאר פארשונג!